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- 库存:
大量
- 供应商:
Solarbio
- 英文名:
胰蛋白酶-EDTA消化液
- 规格:
100ml/20*100ml
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥90.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 20*100ml | 产品价格: | ¥1600.0 |
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | |
| T1300 | 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)不含酚红 | 100ml | |
| T1320 | 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红 | 100ml | |
| T1350 | 胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚红 | 100ml |
产品简介:胰蛋白酶作用于与赖氨酸或精氨酸相连接的肽健,除去细胞间粘蛋白及糖蛋白,影响细胞骨架,打开细胞-细胞,细胞-基质之间得连接从而使细胞从培养板上脱落下来并使细胞分散成单个细胞。
胰蛋白酶液浓度越高,作用越强,但超过一定限度会损伤细胞。常用的胰蛋白酶液浓度是0.25%。用滤器过滤除菌。
胰蛋白酶液消化时间:2-10分钟。用含血清培养液终止其对细胞的消化作用。
EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)不含酚红

简称胰酶EDTA消化液
我们生产的胰蛋白酶消化液一共有三种,分为胰蛋白酶-EDTA消化液(不含酚红);胰蛋白酶-EDTA消化液(含酚红);胰蛋白酶消化液(不含酚红不含EDTA),可根据客户的需要来选择。
其中,胰蛋白酶含量为0.25%(2.5g/L),EDTA含量为0.02%(0.2g/L)。PBS为常用的不含钙镁的细胞培养用PBS。经无菌过滤,可直接使用。
-20℃保存,一年有效。客户收到产品后,可以适当的分装后冻存,每次取一支出来使用。
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量消化液,略盖过细胞即可,室温放置30秒至2分钟或者更长时间。不同的细胞消化时间有所不同,必要时可放37℃消化。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,则加入胰酶细胞消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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10×PBS,PH7.2-7.4,液体
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500ml
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100.00
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1M Hepes溶液(细胞培养)
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125ml
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240.00
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D-Hanks(HBSS)不含钙镁,不含酚红
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500ml
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120.00
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D-Hanks(HBSS)不含钙镁,含酚红
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500ml
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120.00
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D-PBS(DPBS)
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500ml
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80.00
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Hanks(HBSS)含钙镁,不含酚红
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500ml
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120.00
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| 别名 | 胰酶 胰蛋白酶 |
|---|---|
| 英文名称 | Trypsin-EDTA solution,0.25% (without phenol red) |
| CAS | 9002-07-7 |
| 分子式 | C6H15O12P3 |
| 分子量 | 24000 |
| 储存条件 | -20℃ |
| 外观(性状) | 白色或类白色 |
| 单位 | 100ml/瓶 20瓶/箱 |
索莱宝生产的胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA(0.53mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。
产品说明:
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。
保存:-20℃保存,有效期12个月。
使用方法:
1. 贴壁细胞的消化:
a) 吸去培养液,用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
b) 加入少量胰蛋白酶消化液,盖过细胞即可,室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。
c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶消化液重新消化。
e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项:
1.由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;
2.本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;
3.不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关文献:
《Dexmedetomidine attenuates the neurotoxicity of propofol toward primary hippocampal neurons in vitro via Erk1/2/CREB/BDNF signaling pathways》 作者:Youbing Tu,Yubing Liang,Yong Xiao,Jing Lv,Ruicong Guan,Fei Xiao,Yubo Xie,and Qiang Xiao 期刊:Drug Design, Development and Therapy 影响因子:3.486 PMID:30858699
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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
培养箱中。或者在消化时看到细胞有脱落的迹象即可去除消化液,加入适量的培养基轻轻吹打瓶壁,根据细胞密度按照比例接种到细胞培养瓶。经长期对比发现,此方法比离心传代对细胞的损害较小。冻存1. 选择处于对数生长期的细胞。在冻存前一天最好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用 0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液,然后将细胞收集于离心管中离心 (800 r/min,20 S)。2. 配制冷冻保存溶液 (使用前配制
实验材料: 1. 肺组织:取自妊娠14—18周的胎儿; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 消化液:0.25%胰蛋白酶(pH7.6—7.8),0.02%EDTA溶液; 4. 培养液:DMEM或RPMI1640,加10%—20%胎牛血清、青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml; 5. 保存液:10%二甲亚砜或10%甘油; 6. 眼科剪、眼科镊等无菌消毒手术器械;









