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文献和实验即便楼主有 60μl 的蛋白样,我想他也不会有把它们一次全加上去的想法,因为他知道他做的是 western blot,因为他肯定见过、肯定知道 western 的电泳槽是什么样子,浓缩胶上样的孔道多大、多深!:D wenqiang998 换个人做一下。以我多年的经验,这属于 RP 问题…… lihuaibiao 为什么不用丽春红把 PVDF 膜染
蛋白是分子量大概为42kd的膜蛋白,膜蛋白提取可不可以不用到超速离心机,有没有直接用低温高速离心机就可以的提到膜蛋白的方法,42kd的蛋白分子量算不算大?解答:如是需要提取膜蛋白,(而不是只需要提取膜蛋白),可以用Ripa buffer提取膜蛋白和胞浆蛋白,用这个做Western Blot就可以了。如果是非要只提取膜蛋白就要用到超速离心机。42kd 不算大,也不算小,所以,可以按照一般的转移方法实施。R. 蛋白的上样量有没有什么具体的要求?解答:上样量要根据实验的要求来定, 如果要求是定量和半定
Probing and Stripping of Western Blot
Steve Hahn last modified Mon, Mar 22, 1999Western Blot Probing by ECL1. After electroblotting of protein gel to immobilon membrane (See Novex NuPAGE method), mark the side of the membrane not in contact with the gel with permanent ink and cut
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