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- 2026年01月12日
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文献和实验即便楼主有 60μl 的蛋白样，我想他也不会有把它们一次全加上去的想法，因为他知道他做的是 western blot，因为他肯定见过、肯定知道 western 的电泳槽是什么样子，浓缩胶上样的孔道多大、多深！:D wenqiang998 换个人做一下。以我多年的经验，这属于 RP 问题…… lihuaibiao 为什么不用丽春红把 PVDF 膜染
Probing and Stripping of Western Blot
Steve Hahn last modified Mon, Mar 22, 1999Western Blot Probing by ECL1. After electroblotting of protein gel to immobilon membrane (See Novex NuPAGE method), mark the side of the membrane not in contact with the gel with permanent ink and cut
蛋白，用这个做Western Blot就可以了。如果是非要只提取膜蛋白就要用到超速离心机。42kd 不算大，也不算小，所以，可以按照一般的转移方法实施。P. 蛋白的上样量有没有什么具体的要求？解答：上样量要根据实验的要求来定， 如果要求是定量和半定量的Western Blot 则上样量要均等， 如果只是要定性，则没有太大的关系， 尽量多上就行了， 但是不要超过0.3μg/mm2。Q. 一抗，二抗的比例是否重要？解答：比较重要，调整好一抗，二抗的比例，可以去掉部分非特异的本底。3. 抗体R. 做细胞
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