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- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
二年
- 英文名:
ELISA Stop solution (for TMB)
- 库存:
100
- 供应商:
上海远慕生物科技有限公司
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文献和实验水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用 pH 计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。 3. 加样 在 ELISA 中一般有 3 次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在 ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。如测定需用稀释的血清(如间接
体,洗板 5 次,方法同步骤 3。 底物:每孔加底物溶液(TMB) 90 μL,混匀,加上覆膜,37℃ 避光孵育 15 分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短或延长孵育时间,但不可超过 30 分钟。当标准孔出现明显梯度时,即可终止。 终止:每孔加终止液 50 μL,终止反应。提示:终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。 读值:立即用酶标仪在 450 nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪预热,设置好检测程序。 实验完毕后,将未用完的试剂按规定
气泡。加样时间宜控制在10分钟内。 洗涤:甩尽孔内液体,每孔加洗涤液350 μL,浸泡1-2分钟,吸去或甩掉酶标板内的液体,在厚的吸水纸上拍干。重复此洗板步骤3次。提示:此处与其他洗板步骤都可用洗板机。每一步洗涤充分是实验的根本。 HRP酶结合物:每孔加酶结合物工作液100 μL,混匀,加上覆膜,37℃孵育30分钟。 洗涤:弃去孔内液体,洗板5次,方法同步骤2。 底物:每孔加底物溶液(TMB)90 μL,混匀,加上覆膜,37℃避光孵育15分钟左右。提示:根据实际显色情况酌情缩短
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