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-20℃
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- 英文名:
Taq DNA Polymerase
- 库存:
大量
- 供应商:
solarbio
- 规格:
5000
Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase 说明书
货号:PC1100
规格:500U/1000U/2500U
浓度:5U/ul
保存:-20℃保存, 有效期至少一年。
产品简介:
Taq DNA Polymerase 是从克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯
化的, 其分子量为 94 KD。 该酶具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和 5’-3’核酸外切酶活性, 无 3’-5’外切酶活性。 在 PCR
反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为 1-2 kb/分钟,产物 3’端带 A,可直接用于 T/A 载体克隆。该酶无外源
核酸酶和细菌基因组 DNA 的污染,稳定性好,特异性强。
活性定义:
1 单位(U) Taq DNA Polymerase 活力定义为在 74℃,30 分钟内,以活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板,
将 10 nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:
SDS-PAGE 检测 Taq DNA Polymerase 纯度大于 99%;经检测无外源核酸酶活性;PCR 方法检测无宿主残
余 DNA;能有效地扩增人类基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:
20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 稳定剂
适用范围:
用于小于 6kb 的对保真度要求不高的 DNA 片段的 PCR 扩增、DNA 标记、引物延伸、序列测定、平末端加
A 等,产物可以直接用于 T/A 载体克隆。
建议 PCR 条件:
PCR体系(以 50μl反应体系为例)
Template <0.5μg
上游引物(10μM) 1μl
下游引物(10μM) 1μl
10×Buffer(含Mg 2+ ) 5μl
dNTP(各 2.5mM) 4μl
Taq DNA Polymerase 0.5-1μl
ddH2O up to 50μl
注意事项:
1、PCR 反应体系加样时,最后一步加入 Taq DNA Ploymerase,整个过程宜在冰上操作。
2、取 Taq DNA Ploymerase 做 PCR 反应时,请用高压灭菌处理过的吸头。
3、10×Taq Buffer分为含 15 mM Mg 2+ 和不含Mg 2+ 两种,不含Mg 2+ 的Buffer,另外配有 25 mM MgCl 2 。如果没有
特别指定,通常提供的为含有 15 mM Mg 2+ 的Buffer。
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文献和实验out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
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Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain










