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SUMO 蛋白酶;UIP
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UIP
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索莱宝
P2070
1000U(200μL)
SUMO蛋白酶也称Ulp,是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶,它能识别SUMO蛋白的三级结构,而不是氨基酸序列,因此可以高效而且特异性地将SUMO蛋白从重组融合蛋白上切割下来。SUMO蛋白酶在较宽范围的反应环境体系中能保持较高的活性,如温度(4-30℃),PH (5.5-9.5)等,SUMO蛋白酶带有多聚His标签,便于融合蛋白切割后利用亲和层析去除该蛋白酶。
保存条件:
SUMO蛋白酶-80℃长期保存,可存储2年;首次使用后可置于-20℃保存,避免反复冻融。10×SUMO Protease Buffer可置于-20℃保存。
酶活定义:
在1× SUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, pH 8.0) 中,30℃反应1h,剪切>85%的2 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
使用方法说明:
1. 10×SUMO Protease Buffer : 500mM Tris-HCl, 10mM DTT, pH 8.0。
2. SUMO蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例:1:100。
3. 酶切体系:
融合蛋白 1000 μg
10×SUMO Protease Buffer 20μL
SUMO蛋白酶 2μL
ddH2O定容至 1000μL
4. 酶切条件:推荐4℃酶切过夜,用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索,以下酶切分析图片可供参考。
5. 酶切后可取少量样本进行SDS-PAGE分析,若要去除酶切后体系中的SUMO蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。
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