Strep-Tactin Superflow Plus (2

样品体积增加后，对蛋白质的纯化效率有怎样的影响？

Expi Supernatant 进行培养。 纯化过程中，选择柱体积为 0.2 ml 的三种纯化柱：Ni Sepharose 6 FastFlow, Ni Sepharose Excel, 和 Strep-Tactin®XT 4Flow®。 分别用其纯化 60CV (column volume, 柱体积) 和 120CV 的样品，并保持上样样品中的蛋白质含量在纯化柱最大结合载量 80%-95 %。 二、实验结果 01 对比蛋白质回收效率 对于不同的填料，可以从洗脱组分中回

这种阴选方法快速简单，10 分钟得到想要的活性细胞！

(hematopoietic stem cells) 和CD279 (PD-1)。 · 将孵育好的样品加入到 1 ml 的 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱上（柱子最大结合能力：1 x 108个细胞）。 · 当样品完全进入柱子后，加入 10 ml Buffer洗脱两次，就可以得到未结合的细胞了。后续使用流式细胞术检测富集的 NK 细胞。 （此处用到的试剂见文末） 结果与讨论 通过使用阴选将非目的细胞去除后，获得了高纯度的目的细胞群。实验用到了 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析

对比 Strep-tag 与 His-tag 系统异同点？

质，小分子或是金属。当融合有亲和标签的蛋白通过标签-配体作用结合再层析基质上时，通过洗杂步骤，即可去除掉其他的细胞成分。 为了洗脱所需要的蛋白质，通过改变缓冲液的条件，如pH，或通过竞争亲和标签和配体连接的方法来进行。 但怎样的纯化是较为成功的呢？仅达到所需的质量量级，如毫克级（或克级）即可满足吗？ 这些并不简单。质在蛋白纯化中同样尤为重要，比如，就蛋白的生物活性和纯度而言，通常会有所要求。   以下我们来讨论并且比较2种技术： His-tag系统和Strep-tag®系统，都使用了亲和层析法来纯化