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- 2025年07月14日
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上海科敏生物科技有限公司
货号：Z0080
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CAS:151151-32-5/2′-脱氧胞苷-5′-二磷酸三钠盐/Dcdp相关产品>>>>
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CAS:151151-32-5/2′-脱氧胞苷-5′-二磷酸三钠盐/Dcdp关键词：CAS:151151-32-5/2′-脱氧胞苷-5′-二磷酸三钠盐/Dcdp
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文献和实验性，对应不同的杂交方法靶基因（被检基因）应有一定的纯度与丰度。杂交反应的开始是碰撞，探针浓度高则速率增加，一般32P标记探记探针5-100ng/ml，非放射性探针25-1000ng/ml，原位杂交无论放射还是非放射物标记，一般都需0.1-5.0μg/ml。当探针过量时，杂交速率取决于探针长度，如一个100ng/ml20个核苷酸的合成寡核苷酸探针与1-100pg 1kb长的靶基因杂交，10分钟能达到最大杂交率。而相同条件下2kb的克隆探针需160小时。主要原因是这里所指浓度是重量浓度而非摩尔浓度。长探针
最好接近72℃。GC含量（composition）过高或过低都不利于引发反应。上下游引物的GC含量不能相差太大。另外，上下游引物的Tm值（melting temperature）是寡核苷酸的解链温度，即在一定盐浓度条件下，50%寡核苷酸双链解链的温度。有效启动温度，一般高于Tm值5~10℃。若按公式Tm= 4（G+C）+2（A+T）估计引物的Tm值，则有效引物的Tm为55~80℃，其Tm值最好接近72℃以使复性条件最佳。四、引物3′端要避开密码子的第3位。如扩增编码区域，引物3′端不要终止于密码
DNA 链的合成的，合成的方向是由待合成引物的 3′ 端向 5′ 端合成的，相邻的核苷酸通过 3′→5′ 磷酸二酯键连接。第一步是将预先连接在固相载体 CPG 上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应，脱去其 5′- 羟基的保护基团 DMT ，获得游离的 5′- 羟基。第二步，合成 DNA 的原料，亚磷酰胺保护核苷酸单体，与活化剂四氮唑混合，得到核苷亚磷酸活化中间体，它的 3′ 端被活化， 5′- 羟基仍然被 DMT 保护，与溶液中游离的 5′- 羟基发生缩合反应。第三步，带帽 (capping
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