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上海科敏生物科技有限公司
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CAS:9008-97-3/植物血球凝集素PHA-P/植物血凝素/PHA-P相关产品>>>>
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文献和实验方法 实 验 原 理 自身正处于活跃分裂状态或用植物 血球凝集素(phytohemagglutinin, PHA)处理后处于分裂状态的组织或细胞,均可用于染色体标本的制作与分析。在正常动物体中,精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织,可不经PHA处理直接用来制作染色体标本。但在取材方面,精巢又比骨髓要简易一些,故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。 对于小鼠精巢染色体标本的制作,一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成,使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停
-2000rpm10分钟,弃上清,留细胞沉虑。若一次消化不彻底,可反复消化; (7)低渗及预固定:加预温37℃KCL溶液10ml,37℃温育30分钟,加0.5-1ml新鲜配制的3∶1甲醇冰乙酸固定液预固定,用气泡吹打细胞使其混匀。 (8)固定:用新鲜配制的3∶2甲醇冰乙酸固定液固定三次,每次30分钟。固定液加入时沿管壁缓慢加入; (9)制片及干燥:用绒毛制片; (10)分带处理。九、人外周血淋巴细胞培养 在正常情况下,人外周血中是没有分裂相的,只有在异常情况下才能发现。植物血球凝集素(PHA
试验试剂盒推荐使用中国仓鼠肺细胞株(CHL)。2.3 试验方案选择试验分为使用和不使用 cytoB 两种方案。方案一:在细胞经过受试物处理,有丝分裂前使用 cytoB,然后观察分析已完成一次有丝分裂的细胞 (双核细胞) 微核率。当选用人类淋巴细胞时, 建议采用方案一,因为不同来源的细胞周期不同,而且不是所有的细胞都对植物血球凝集素 (PHA) 有反应。方案二:不使用 cytoB,细胞经过受试物处理后观察分析细胞微核率。如果有证据表明受试物干扰 cytoB 的活性,或 cytoB 可能影响细胞的生长 (如小鼠
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