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- 英文名:
Mycoplasma
- 库存:
少量现货
- 供应商:
上海甄准生物科技
- 保存条件:
-20度
- 规格:
5ml
支原体去除试剂(MRA)
包装: 5 ml (50 ug/ml)
1. 介绍:
支原体去除实际(MRA)是由大日本制药株式会社以用于细胞培养为目的而开发。该试剂已被证明可有效地去除被污染的培养基中的各种支原体。MRA也可用于防止已修复培养基被支原体再次污染。
1毫升该产品中含有50微克的4-氧代喹啉-3-羧酸衍生物(4-oxo-quinoline-3-carboxylic acid derivative)。
2. 特点:
MRA对不同类型的支原体显示出较强的抗支原体活性
- 如果细胞被MRA治愈,当使用预防性剂量的MRA时,培养基不会发现被同种的支原体再次污染。
- MRA使用非常方便。只需添加到被支原体污染的细胞培养基中并孵育一个星期。
- 作为预防措施, MRA可用于防止支原体污染物。 MRA不应当被用来作为良好的细胞培养技术的代替物。
将MRA加到被支原体污染的细胞培养基,终浓度为0.5微克/毫升,孵化一个星期。 (比如在一个25 cm2 的培养瓶中,10ml的培养基添加0.1毫升的MRA)
- 使用含有相同浓度MRA的培养基换液。
- 使用不含MRA的细胞培养基多次换液以确认支原体的污染不再发生。
- 建议用一个支原体检测试剂盒(如Mycoplasma Hoechst Stain试剂盒,产品目录号3030000,或Immu-Mark Myco-Test试验试剂盒,产品目录号3020000)来检测污染。
- 如果担心血清或胰蛋白酶中存在支原体,那在培养基中添加终浓度为0.5微克/毫升的MRA,可以阻止污染物出现在培养基中。
5. 注意事项MRA检查是一种研究用试剂,仅仅作为一种细胞培养基的支原体清除剂。MRA是一种合成分子。使用该产品时要注意遵守良好的实验室规范。
- 建议使用浓度为0.5微克/毫升,该浓度不能消除支原体时可提高至1微克/毫升。
- 使用推荐浓度时,MRA的细胞毒性低。但是,对于任何特定功能的细胞,建议保留理想的细胞特征以供处理后确认。
请注意感染程度,细胞类型和支原体株可能会影响具体结果。每个研究人员应使用的样本数据作为指导,以便确定有效的MRA浓度需求,以符合其特定细胞系和支原体株。
- 支原体去除效果--自然感染
| MRA浓度(ug/ml) | 持续培养时间 (天) | ||||
| 0 | 7 | 14 | 21 | ||
| 人源性细胞A(人黑素瘤) | 0.39 | + | - | - | - |
| 0.2 | + | - | - | - | |
| 0.1 | + | - | + | + | |
| 0 | + | + | + | + | |
| 人源性细胞B(人肺癌) | 0.78 | + | - | - | - |
| 0.39 | + | - | - | - | |
| 0.2 | + | - | - | - | |
| 0.1 | + | + | + | + | |
| 0 | + | + | + | + | |
- 支原体阴性
MRA持续处理时间:7天
- MRA与市场上其他药物功能的比较
| MRA | Tiamulin | Minocycline | ||||
| MIC* | MMC** | MIC | MMC | MIC | MMC | |
| M. orale CH-19299 | 0.05 | 0.1 | 0.0031 | 3.13 | 0.05 | 25 |
| M. arginini G-230 | 0.1 | 0.2 | 0.0063 | 12.5 | 0.2 | >100 |
| M. hyorhinis BST-7 | 0.05 | 0.1 | 0.0031 | 0.39 | 0.0031 | 0.39 |
| A. laidlawii PG-8 | 0.0125 | 0.025 | 0.05 | >100 | 0.05 | >100 |
| MMC/MIC | 2 | 128 -------------> 2048 | 512 -------------> 2048 | |||
A代表血浆
MIC代表最小抑制浓度
MMC代表最小灭支原体浓度
3. MRA对其他支原体的最小抑制浓度(ug/ml)
| Species | MIC |
| Mycoplasma fermentans PG-18 | 0.0125 |
| Mycoplasma salivarium PG-20 | 0.1 |
| Mycoplasma hominis PG-21 | 0.1 |
| Mycoplasma buccale CH-20247 | 0.025 |
上海甄准生物科技有限公司
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文献和实验污染不除,实验结果势必或多或少产生偏差,故进行实验前,确定细胞为mycoplasma-free至关重要,实验结果之数据才有意义。 支原体污染一般来源于血清,实验仪器、培养基或其他试剂蔓延开来。怎样预防和去除支原体污染呢?一般只有三种抗生素(四环素,大环内脂和喹诺酮)能有效对付支原体。在低浓度时,这些抗生素不会产生耐药性,且对哺乳动物细胞的毒性较小。四环素和大环内酯能结合30S和50S核糖体亚基,从而抑制蛋白质合成,喹诺酮抑制DNA旋转酶。因此可以在细菌DNA复制及蛋白质合成两个层面上抑制
一、原理: 利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst 33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。 二、试剂盒组分 :
光小点,即为支原体的DNA染色斑,说明有支原体污染。 二、试剂盒组分: 1、Hoechst33258工作液50ml 2、固定液50ml 3、封固液10ml 4、说明书1份 三、未提供的设备及耗材: 1、荧光显微镜 2、6孔细胞培养板 3、22×22mm盖玻片 4、载玻片 四、操作步骤: (一)、贴壁细胞: 1、被检细胞接种在无菌的6孔细胞培养板中,接种
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