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文献和实验相关专题 误区:凝胶试剂总是修饰我的蛋白 事实:NuPAGE® 凝胶试剂实际上保护了您的蛋白 更中性pH是关键 tris-甘氨酸凝胶系统的根本缺点是样品制备过程中的蛋白降解。在使用pH 6.8的tris-甘氨酸样品缓冲液时,样品在缓冲液中加热,因tris-甘氨酸的负温度系数导致pH值下降。这最终导致蛋白水解。 NuPAGE® 凝胶试剂通过维持较高的样品缓冲液pH值,保留了蛋白样品的完整
ZOOM® IPGRunner™系统:简化的双向电泳(2D gel eletrophoresis)
Novex 4-12% Bis-TrisZOOM®胶进行第二向电泳。在NuPAGE LDS样品缓冲液进行第二向平衡,缓冲液中含有还原剂和烷化剂。蛋白巯基的烷基化减少了由于SDS电泳期间二硫键的再形成和残余DTT的存在导致的垂直脱尾。ZOOM® 胶条在5ml包含50mM DTT 1X NuPAGE® LDS样品缓冲液中孵育15分钟,接下来在包含125 mM碘代乙酰胺( iodoacetamide)的1X NuPAGE® LDS样品缓冲液中孵育15分钟。然后将每一个IPG胶条放入ZOOM®胶加样孔,再加
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