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- 技术资料
1、产品规格：
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套（1×10⁶cells/T25培养瓶） |
套（1×10⁶cells/冻存管×2） |
2、商品介绍：
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细胞名称： |
Hepa1-6-LUC：荧光素酶标记的小鼠肝癌细胞 |
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种属来源： |
小鼠 |
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组织来源： |
肝 |
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简介： |
Hepa 1-6细胞是C57/L小鼠中产生的BW7756小鼠肝癌的衍生株。 |
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细胞形态： |
上皮细胞样 |
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生长特性： |
贴壁生长 |
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特征特性： |
通过慢病毒感染的方式使Hepa1-6细胞稳定表达萤光素酶蛋白LUC，后通过嘌呤霉素抗性筛选和动物成瘤实验获得LUC表达的阳性细胞群。 |
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生物安全等级： |
1级 |
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推荐传代比例： |
0.25 %含 EDTA 胰酶，37 ℃ 2 min，干消，1:4 传，3 天长满 |
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推荐换液频率： |
2-3次/周 |
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生长培养基： |
DMEM-H+10 %FBS+1 %P/S；该细胞系为puro抗性，可根据需要加入2 μg/mL Puromycin处理细胞。 |
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培养条件： |
温度：37 ℃；CO2：5 % |
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冻存条件： |
选用无血清无蛋白非程序细胞冻存液（含DMSO，透亮色），直接转-80度冰箱隔天后液氮保存 或者 FBS 90%+DMSO 10%（乳黄色），程序降温盒转-80度冰箱隔天后液氮保存 （细胞复苏时切记培养基稀释后再离心！！！） |
DMEM/High Glucose，即DMEM（Dulbecco，s Modified Eagle Medium）高糖培养基，是在MEM培养基基础上改良而来。DMEM高糖培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞，如多种哺乳动物原代细胞以及细胞系的培养。本产品含多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等成分，不含蛋白质或生长因子，需根据细胞种类添加5-10 %血清或无血清添加物使用。
胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。本产品为标准胎牛血清，已经过热灭活处理及过滤除菌，使用前无需进行热灭活，低温缓慢解冻后即可使用。
3、图片展示：
4、STR鉴定-STR位点信息：
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STR 1-1 |
14,15,16 |
STR 11-2 |
16 |
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STR 1-2 |
13 |
STR 12-1 |
17 |
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STR 2-1 |
14 |
STR 13-1 |
17.1 |
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STR 3-2 |
10 |
STR 15-3 |
17,18,19 |
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STR 4-2 |
18.3,19.3 |
STR 17-2 |
14 |
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STR 5-5 |
17 |
STR 18-3 |
16,17 |
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STR 6-4 |
18,19 |
STR 19-2 |
10,11 |
|
STR 6-7 |
15 |
STR X-1 |
25 |
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STR 7-1 |
25.2 |
D4S2408 |
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STR 8-1 |
15,16 |
D8S1106 |
5、储存运输：
细胞：T25培养瓶常温运输；冻存管干冰运输，液氮保存。
培养基：常温运输，2-8 ℃保存，有效期12个月。
6、注意事项：
1.优先推荐复苏细胞，7-8月复苏细胞加冰袋发货，12-2月复苏细胞加暖宝宝发货。
2.收到T25培养瓶寄送的细胞时，请及时检查外包装是否完好，细胞培养瓶是否损坏、漏液，培养基是否浑浊，如有请尽快联系。
3.收到冻存管寄送的细胞时，请及时查看泡沫盒内是否还有干冰，冻存管内细胞是否是冻存状态，如无特殊情况请及时解冻复苏培养。
4.细胞复苏、培养、传代等步骤及注意事项请参考细胞说明书。
5.请严格执行无菌操作，避免污染。
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报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
选报告基因时，很多人随手挑个 EGFP 就转了，等要做定量才发现有光毒、有背景。结论先说：要肉眼/显微镜看定位和活细胞成像，选荧光蛋白（EGFP、mCherry）；要测基因表达强弱、做低背景定量，选荧光素酶。两者不是谁好谁坏，是干的活不一样。 先给一个直接答案 选报告基因时，很多人随手挑个 EGFP 就转了，等要做定量才发现有光毒、有背景。 报告基因是干嘛的 报告基因就是一段"自带可见信号"的标签基因，克隆到你关心的启动子或基因下游，靠它的信号强弱/位置反推目标基因表达得怎么样。科研里最常
的双荧光素酶检测报告基因试剂盒（DLR）（真的很好使，你数据做不好是你没好好研究这个系统，没优化好质粒），还有做microRNA的系统。 对于检测仪器，绿色荧光蛋白等一个是检测静态的，观测用荧光显微镜，例如看看带有GFP标签的融合蛋白在细胞中的定位啦；另外一个是检测动态的，用荧光光度计来检测，如在FRET实验中测能量迁移，如果是多功能检测仪，这时就看仪器检测模式中有没有检测fluorescence（荧光）一项，不同的荧光蛋白激发光和发射光的频率各不相同，检测是要注意设置仪器参数，频率不同
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