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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
FuniCut® XbaI
- 供应商:
翌圣生物
- 保存条件:
-25~-15℃保存,有效期2年。
- 规格:
500 T(15033ES76)
产品描述:
FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA 等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品特色:
| 识别位置 | 5'-T↓CTAGA-3' 3'-AGATC↑T-5' |
| 推荐反应条件 | 1×FuniCut® 缓冲液;最适37℃孵育 |
| 酶活 | 20 U/μL |
| 失活条件 | 80°C孵育20 min |
| 同裂酶 | TthHB8I |
| 甲基化修饰影响 | Dam:序列可能重叠,剪切阻断 |
储存条件:
-25~-15℃保存,有效期2年。
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文献和实验常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)(BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI、XhoI等) 在分子克隆实验中,限制性内切酶是必不可少的工具酶。 无论是构建克隆载体还是表达载体,要根据载体选择合适的内切酶(当然,使用T载就不必考虑了)。先将引物设计好,然后添加酶切识别序列到引物5' 端。常用的内切酶比如BamHI、EcoRI、HindIII、NdeI
. Smith 于偶然中发现,流感嗜血杆菌 (Haemophilus influenzae)能迅速降解外源的噬菌体 DNA ,其细胞提取液可降解 E.coli DNA ,但不能降解自身 DNA ,从而找到 HindⅡ 限制性内切酶。 HindⅡ 限制性内切酶位点和切割位点如下: 5 '… GTPy ↓ PuAC … 3 ' 3 '… CAPu ↑ PyTG … 5 ' 从此以后,发现的限制酶越来越多,并且许多已经在实践中得到应用。 EcoRⅠ
【求助】请教关于xbaI酶切位点甲基化的问题(看了这么多帖子,都好象没分析到位啊)
2012hunanjob 在xbaI酶切位点上:T^CTAGA碱基对应的是AGATC^T,因为质粒是双链,所以在质粒的xbaI酶切位点上中间肯定有GATC,所以说:我觉得理论上只要是dam+细菌提出来的质粒,xbaI酶切位点都受甲基化影响而切不开.但是我见过别人也是用dam+菌扩增过质粒,用xbaI也可以切开它的酶切位点~~~所以我就迷糊了,请各位大侠们多多指点,小弟在此感激不尽了~~~ 2012hunanjob 顶,有没有
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