Anti-Hu CD45 PerCP-Cyanine5.5

流式课堂 | 流式对照设置之同型对照

蛋白分子 以 CD45＋白细胞样本为例，在排除了死细胞和粘连体后，未进行染色、也未进行 Fc 受体阻断的空白样本，各通道荧光处于低水平。如图所示： 染同型对照后，背景荧光增强。 针对这种因 FcR 导致的强背景，建议可以添加 FcR 封闭剂，如下图所示： 阻断 FcR 后，染同型对照，背景荧光恢复到与空白相似。 #03 什么时候需要做同型对照？ （1）对于阴阳性分群明显的指标，不需要同型对照即可设门，例如 CD3、CD4、CD8 等用于 T 细胞的检测指标。对于阴阳性分群不清楚的指标，例如 CD25、CD

从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程

分选仪可实现从同一肿瘤样本中连续分离高纯度和高细胞活力的 TIL 细胞的两个亚群：肿瘤浸润性 NK 细胞和肿瘤浸润性 B 细胞。 2.1  肿瘤浸润性 NK 细胞分选 经过预富集所得到的 CD45+ TIL 细胞通过第一轮的分选，可得到纯度高于 96% 且细胞存活率高于 98% 的肿瘤浸润性 NK 细胞 (CD45+/CD11b–/Anti-NKp46+， 见图 B)。 2.2  肿瘤浸润性 B 细胞分选 以第一轮分选剩余的非目标细胞 (即非肿瘤浸润性 NK 细胞) 作为起始样本进行的第二轮分选 , 可得

流式实验如何配色？

细胞类型中，相应抗原的表达量，可以粗略地将抗原分子分为三类： 1. 很容易鉴定、容易区分阴阳性细胞群、阴阳性峰明显分开的抗原。例如：CD3，CD4，CD19 等。 2. 很容易鉴定、较高水平表达、经常连续性表达。例如：CD27，CD28，CD45RA, CD45RO 等。 3. 低水平表达、激活性 Marker、未知但关键。例如：CD25，STAT5，Foxp3 等。 表达量的强弱，可以参考厂家的质检结果，但更多地需要参考文献里具体细胞群体的表达。 第三步、了解实验所用流式细胞仪的配置