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文献和实验近年来,ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷,尤其是CRISPR/Cas9,一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时,各大公司也开发出一系列相应的产品,其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。 目前,市面上只有Genloci的Cruiser™、Transgenomic的SURVEYOR和NEB的T7EI这三种产品和测序这种方法,被用于基因敲除阳性克隆的筛选。然而,SURVEYOR是进口产品,价格贵,货期长;T7EI可以识别多种DNA结构,如十字
近日,Cruiser™与市面上易出现假阳性的X错配酶,进行比较,实验结果见下: 下图为3T3细胞FADD基因敲除,已知在3T3细胞中FADD基因的敲除效率很低(其敲除pool测序无双峰),挑24个单克隆后经X酶切结果显示如图2,而经Cruiser™酶切结果显示如图3 图2 3T3细胞FADD基因X酶检测电泳图 图3 3T3细胞FADD基因Cruiser™检测电泳图 P1—Cruiser™酶切阳性对照 P2—X酶切阳性对照 结论:如上图结果显示,X酶
by an individual sample or a pool of samples to rapidly investigate the presence of variable DNA methylation patterns. The use of pools and serial pyrosequencing, that is, the successive use of several pyrosequencing primers on the same DNA template, significantly
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