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文献和实验Identification of T-Cell Epitopes Using ELISpot and Peptide Pool Arrays
4+ cells prior to the assay, we are able to determine the phenotype of the responding cells to each of the peptide epitopes identified. Use of this method will allow the identification of both CD4+ and CD8+ T-cell epitopes without the need for MHC allele
a detectable response)and mitogen。Positive control:CEF peptide pool 和 PHA 刺激。CEF peptide pool(cat:PM-CEF-E,JPT):先用纯的 DMSO(40 μl)溶解,再用 1 × PBS 稀释到终浓度,DMSO 的终浓度必须小于 1%,以免细胞毒性。PHA:先加 1 ml 无菌的 DPBS 或者细胞培养基到 5 mg 的 PHA 凝集素中,轻轻混匀溶解,使用之前再用无菌的 buffer 稀释到所需的工作液浓度。注意不要过滤
。如今市面上只有Cruiser™和Surveyor两个品牌。因为Cruiser™价格合适,且相比于进口代理产品拥有货期短的优点(国内可以2-3天内到货),做到真正质优价廉。 据了解,另一种被广泛应用于基因敲除筛选的X酶,其最早并不是为了做基因敲除筛选而生产的。它除了识别错配外,还可以识别十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链 DNA,正是因为这个特点,很容易导致假阳性的现象。 图1. Holliday交叉(Holliday junction),无错配结构
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