MKL-S917644-2ml,Laemmli蛋白上样缓冲液

我收集的几个Northern杂交protocol（同位素，DIG，生物素等），供大家参考！

至60~70℃时，依次向其中加入9ml甲醛、5ml 10×MOPS缓冲液和0.5μl溴化乙锭，混合均匀后立即灌胶（注意避免产生气泡）。 4．样品制备：取DEPC处理过的500μl小离心管，依次加入10×MOPS缓冲液2μl、甲醛3.5μl、甲酰胺（去离子）10μl、RNA样品4.5μl，混合均匀；将离心管置于60℃水浴中保温10min.，再置于冰上2min.；向每管中加入3μl上样染料，混匀。 5．上样：将制备好的凝胶放入电泳槽中（上样孔一侧靠近阴极），加入电泳缓冲液（1×MOPS缓冲液），液面

免疫胶体金(Immune colloidal gold)

金蛋白结合物装入透析袋，在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1 ／ 5 ～ 1 ／ 10 。再经 1 500r/min 离心 20min 。取上清加至 Sephacryl S-400 （丙烯葡聚糖凝胶 S-400 ）层析柱分别纯化。层析柱为 0.8 cm × 20cm ，加样量为床体积的 1 ／ 10 ，以 0.02Mol/L PBS 液洗脱（内含 0.1 ％ BSA ， 0.05 ％ NaN3 ， pH8.2 者用 IgG 标记物），流速为 8ml/h 。按红色深浅分管

DNA重组实验中的常用技术

5min。（8）小心吸尽上清液，将离心管倒置于一张纸巾上，再将附于管壁的液滴除尽。（9）用75%乙醇于4℃洗涤，同上离心去上清真空抽干。（10）加50μl的1×TE（含20μg/ml无酶的胰RNA酶），振荡，贮存于-20℃。（二）质粒的大量制备（1）同上1.（1）（2）将1ml含菌液倒入含相应抗生素的Lb 100ml中，37℃振荡培养至A590 =1.0(5～6h)。（3）加氯霉素（170μg/ml）扩增，37℃温箱中培养过夜。（4）收集菌液于离心管中，冰浴10min。3000rpm,离心10min