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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
鸭
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
鸭谷胱甘肽巯基转移酶(GST)ELISA检测试剂盒
仅供科研使用,不可用于临床诊断,用于检测鸭血清、血浆、组织匀浆等样本中 GST 蛋白浓度
基础信息
- 产品名称:鸭谷胱甘肽巯基转移酶(GST)ELISA检测试剂盒
- 英文名称:Duck Glutathione S-Transferase (GST) ELISA Kit
- 规格:48T / 96T
- 检测方法:双抗体夹心 ELISA
- 保存条件:2~8℃避光密封保存,禁止冷冻
- 有效期:6 个月
- 读板波长:酶标仪 450 nm
适用样本类型
鸭血清、血浆、肝脏 / 肾脏组织匀浆、细胞裂解液、腹水等生物体液。
样本注意:避免反复冻融;组织匀浆需冰上操作,离心取上清;样本如浓度超出检测范围,用试剂盒样本稀释液稀释后复测。
试剂盒性能指标
- 检测范围:2~64 ng/mL
- 最低检测限(灵敏度):<0.1 ng/mL
- 精密度:批内 CV<10%;批间 CV<15%
- 加标回收率:85%~115%
- 特异性:抗鸭 GST 特异性抗体,与鸭 GST 特异性结合,同家族其他蛋白、同源物种(鸡、鹅)交叉反应极低;无明显交叉反应。
试剂盒组分
1. 预包被微孔板(96 孔,可拆)
2. GST 标准品(冻干品)
3. 标准品稀释液
4. 样本稀释液
5. 生物素化检测抗体工作液
6. HRP 标记亲和素工作液
7. 洗涤液(20× 浓缩)
8. TMB 显色底物液
9. 终止液(稀硫酸)
10. 说明书、封板膜
简要实验操作流程
1. 试剂平衡至室温,浓缩洗涤液稀释备用;标准品复溶,梯度稀释制作标准曲线
2. 加标准品 / 样本,每孔 100 μL,封板,37℃孵育 60 min
3. 弃液,洗板 3~5 次,拍干
4. 加入生物素化抗体工作液 100 μL,37℃孵育 60 min;洗板
5. HRP 亲和素工作液 100 μL,37℃孵育 30 min;洗板
6. TMB 底物 90 μL,避光 37℃显色 10~20 min
7. 终止液 50 μL 终止反应,**5 min 内酶标仪读取 450 nm OD 值**
8. 软件拟合标准曲线,计算样本 GST 浓度
注意事项
1. 本试剂盒仅科研,不能用于动物临床诊断;
2. 所有孵育步骤必须封板,避免蒸发与污染;
3. TMB 底物避光保存,变蓝失效不可使用;
4. 终止液具有腐蚀性,操作做好防护;
5. 移液器、洗板操作会直接影响 CV 值,建议做复孔。
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文献和实验鸭谷胱甘肽巯基转移酶(GST)ELISA检测试剂盒
一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化:①
方式,其优点是标签小,纯化步骤简便,纯化条件温和,能纯化可溶性/包涵体蛋白,一般不会影响蛋白的功能结构,且可以纯化出大量的目标蛋白,但该标签不适合易氧化蛋白或膜蛋白的纯化。GST tag(谷胱甘肽巯基转移酶) 的洗脱条件温和,有助于保持蛋白功能活性,适合 pull-down 检测,具有很好的线性动态范围。但缺点是分子量较大,可能会影响蛋白质的功能和下游实验。另外,如果蛋白不可溶,很难用变性的方法进行纯化。 MBP tag(麦芽糖结合蛋白标签) 可以减少目标蛋白的降解,增加蛋白的表达量和稳定性,提高
pull-down实验:是一个行之有效的验证酵母双杂交系统的体外试验技术。其基本原理是先构建靶蛋白-GST融合蛋白载体,然后进行体外表达及纯化。将得到的靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,充当一种“诱饵蛋白”,然后将目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的蛋白,将目的蛋白洗脱下来,通过SDS-PAGE电泳及western blot分析证实两种蛋白间的相互作用。 以上三种方法是比较经典的研究筛选和验证蛋白互作关系
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