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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
C1498-LUC(
- 库存:
200
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
急性髓系白血病
- 细胞类型:
-
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
急性髓系白血病
- 相关疾病:
-
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
-
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 器官来源:
-
- 运输方式:
常温或干冰运输
- 年限:
可无限传代,具体根据细胞情况而定
- 生长状态:
悬浮生长
- 规格:
1*10^6cells/T25培养瓶
C1498-LUC小鼠急性骨髓性白血病带荧光素酶
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | C1498-LUC(小鼠急性骨髓性白血病带荧光素酶) |
细胞别称 | C1498-LUC |
商品货号 | KL-C1039M-L |
种属来源 | 小鼠 |
年龄性别 | - |
组织来源 | 急性髓系白血病 |
生长特性 | 悬浮生长 |
细胞形态 | 淋巴母细胞样 |
背景简介 | - |
生物安全等级 | - |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | DMEM-H+10%FBS+1%P/S |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
倍增时间 | ~24-30小时 |
细胞筛选:
该细胞为已经稳定转染LUC的细胞,随细胞传代次数的增加,其LUC荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
细胞经过20μg/ml嘌呤霉素筛选,平时培养可维持10μg/ml嘌呤霉素
二、细胞接收后的处理
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于室温放置约1h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2) 离心管直接在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞后,根据离心后的沉淀量进行传代,转移至T25培养瓶中后,请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:传代时使用【半换液法】对细胞状态有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代,刚收到细胞时建议1:2传代较为合适。
4) 备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
三、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含8mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
【半换液法】
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。
【离心换液法】
如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a) 收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b) 根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度1×10^6~1×10^7/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c) 将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
四、培养注意事项
1) 细胞出现问题,予以重发情况
a) 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
b) 细胞污染问题,请在收到产品3 天内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
c) 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后2 天后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
d) 干冰冻存发货的细胞复苏后2天后或常温发货的细胞静置2 小时候并且未开封,出现污染,重发;
e) 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,和每天的细胞照片,核实后予重发;
f) 细胞收到当天以及第2,3 天请拍照,3 天未告知的,视为产品合格。4-7 天内出现问题需提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题的照片以及细胞相关操作的详细步骤,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。
2) 细胞出现问题,不予以重发的情况
a) 客户操作造成细胞污染,不重发;
b) 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发;
c) 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
d) 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3 天的细胞状态照片,不重发;
e) 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发;
f) 收到细胞并发现问题与客服人员沟通的时间证明大于7 天的,不重发;
g) 视具体情况而定
五、注意事项
1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
3. 该细胞仅供科研使用!说明书仅供参考以实际到货说明书为准!
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