- ￥2500
- KALANG/康朗生物
- 上海
- KL-C1870H-L
- 2026年09月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
U251/LUC(
- 库存：
200
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
-
- 细胞类型：
-
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
脑组织
- 相关疾病：
-
- 物种来源：
人
- 免疫类型：
-
- 细胞形态：
成纤维细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 器官来源：
-
- 运输方式：
常温或干冰运输
- 年限：
可无限传代，具体根据细胞情况而定
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
1*10^6cells/T25培养瓶
U251/LUC（人神经胶质细胞瘤细胞带荧光素酶）
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | U251/LUC（人神经胶质细胞瘤细胞带荧光素酶） |
细胞别称 | U251/LUC |
商品货号 | KL-C1870H-L |
种属来源 | 人 |
培养基 | DMEM培养基 ；10%胎牛血清 ；1%双抗 |
组织来源 | 脑组织 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
背景介绍 | U251细胞源自一位患者的胶质母细胞瘤组织。 |
生物安全等级 | 1 |
细胞规格 | 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
培养条件 | 气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃ |
冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
一、细胞收到后操作流程
1.收到细胞拿回实验室后，先打开外包装，用 75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，放到显微镜下观察细胞状态。因运输问题，细胞会有不同程度影响，先不要打开培养瓶盖，放到培养箱静置 4 小时左右，以便稳定细胞状态。
2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态(所拍照片作为后期售后依据)。建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。
3.贴壁细胞：若细胞生长密度超过 80%时，根据情况传代，若细胞未超过 80%汇合度时，可将瓶装的完全培养液移入废液缸中，原瓶（T25 瓶）保留 6-8ml 完全培养液继续培养，直至细胞密度超过 80%以后再进行传代。
4.悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体转移至离心管，1000RPM 离心 5 分钟，弃去上清液，管底细胞沉淀加入 10ml 完全培养基吹打、重悬。放入新的细胞培养瓶/皿中培养过夜，根据细胞密度及生长情况分瓶传代。
二、细胞常规培养步骤（请严格遵守无菌操作）
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 5mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 6cm 皿中，加入约 6ml 培养基，培养过夜），第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养瓶中上清液，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1-2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻轻敲几下培养瓶后加 6ml 完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落、吹散。
3. 吹打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 到 1：4 的比例分到新的含 6ml 培养基的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM 条件下离心 5 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 6ml 培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按 1：2到 1：3 的比例分到新的含 6ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM 条件下离心 5 分钟，去除上清，
按冻存数量加入血清及 DMSO，冻存比例为 90%FBS+10%DMSO。
注意事项：
1. 收到细胞后请尽快更换为含10% FBS的新鲜培养基，不建议使用原瓶中运输用培养基。
2. 如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时拍照并联系实验室。
3. 细胞任何售后问题，均需拍照存档并及时联系客服。
细胞用途：仅供科研使用，不能用于临床诊断使用，细胞培养需要耐心与细心，希望您能获得一个满意的结果。
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文献和实验的原位瘤、转移瘤及自发瘤。如Hollingshead等利用人类胶质瘤细胞系U251构建U251-HRE细胞，其中的荧光素酶基因表达受可诱导启动子的操控，低氧状态为其诱导条件，因此在细胞处于低氧状态下荧光素酶基因开始表达。将此肿瘤细胞sc于裸鼠体内，肿瘤增殖早期并无明显荧光素酶表达，当肿瘤达到了300～500mg时，局部组织出现低氧状态，此时可监测到荧光素酶显著表达。这种方法不仅仅监测肿瘤本身，更重要的是可以监测肿瘤细胞所处的微环境。 2． 在监测感染和炎症方面的应用 荧光素酶基因标记病毒和细菌
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
基因（Genechem）是做报告基因与多标记载体（过表达、干扰、敲除）可作为候选品牌之一，能提供 EGFP、mCherry、Luciferase 等多种报告基因灵活组合。 可提供的多报告基因能力：EGFP / mCherry / ZsGreen1 荧光标记载体，萤火虫荧光素酶（如 GV534 MCS-LUC2）+ 海肾对照（CV045）双报告系统，以及荧光蛋白与荧光素酶同载体组合的定制方案。 特色产品里，悬浮细胞专用慢病毒用 PRRL 载体骨架、换悬浮适用型启动子，适合原代/难转染细胞带报告基因稳定表达；常规慢病
【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂？
阿兰梦 之前没有做过，只是根据文献的简单描述依葫芦画瓢，但是毕竟是好几千的试剂，生怕弄错了 临床医生一下子做科研，确实很多地方不懂，很艰难 目的是想用双荧光素酶报告基因的方法检测药物内皮细胞的NF-KB的转录活性影响，需要买pNF-kB-Luc 报告质粒，碧云天有；然后需要双荧光素酶报告基因检测系统，promega有；另外还需要一个内参，文献是β-半乳糖苷酶 问题是： 1、不知道买哪一个对： http://www
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