M7449-200UL默克Merck Sigma-Aldri

支原体污染的特点及检验（2）

; M. pirum)　　PCR reagents :　　Taq polymerase ( 5 U / ul )　　dNTP( dGTP, dCTP, dTTP, dATP, 1.25 mM each )　　10x PCR buffer (with 1.5mM MgCl2)　　25mM MgCl2　　sterile ddH2O　　Machine / Equipment：　　PCR thermal cycler　　agarose电泳设备　　DNA电泳胶体观察设备　　无菌PCR反应管　　无菌1.5 ml

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）+ 0.5 ul 1 M DTT + 5 ul 200X 蛋白酶抑制剂混合物（PIC），冰上预冷。因此，我们就把所有体积乘以 3，来配制啦，简单的算术题。缓冲液 B（微球菌核酸酶的酶切缓冲液）：我们按照实验设计，配了 3 个反应需要的体积，同时加入合适的 DTT（此处我们牢记不能加蛋白酶抑制剂混合物 PIC！！！）。其他：找到固定细胞用的分子生物学级别的 37% 甲醛溶液（我们用的是 SIGMA 生产的 F8775）；准备足量预冷的 PBS，用于洗涤细胞；再把离心机也调到 4 度预冷。一切妥妥的，正式开始实验

Blue Native Gel Electrophoresis

% glycerol, 25 mM BisTrsi-HCl, pH7.0 Mix gently Load 5.5 ul Protein marker Mr (kDa) Ferritin 880, 440 β-amylase 200 BSA 132, 66 β-lactoglobulin 35 Thyroglobulin (670kD) migrates at position close to ferritin dimer (880kD).