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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
试剂
- 保质期:
试剂
- 英文名:
-
- 库存:
有
- 供应商:
福州木辰
- CAS号:
408-35-5
- 规格:
P9767-5G
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文献和实验template/primer of 2ul 1 x labelling mix, 1ul 300mM DTT, 1ul [a-35S]-dATP (~ 1000Ci/mmol) and 3 units T7 DNA polymerase (2ul of a 1.5 units/ ul solution). The solution is pipetted briefly to mix the components and incubated at 4℃ for 2-5 minutes
15倍,同时,模板DNA 要高于0.5pmol。由于DNA 模板量的不足,会降低标记反应的程度,即只标记引物后的几个核苷酸。 (2)用冰预冷的TE缓冲液按1:8稀释T7 DNA 聚合酶。酶液稀释后应立即使用,置于冰浴不宜超过60分钟。不得使用标记混合物、DTT溶液或非缓冲液类溶液稀释酶液。 (3)在已退火的引物 -模板混合物中,依次加入: 0.1mol/L DTT 1.0ml 标记混合物 2.0ml [a-35P]dATP或[a-35S]dATP 0.5ml 已稀释好的T
试剂盒。 (2)丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺储备液(38%丙烯酰胺 W/V,2%甲叉双丙烯酰胺 W/V):95g丙烯酰胺,5g甲叉双丙烯酰胺溶于140ml 双蒸水中,定容至250ml,0.45mm过滤器过滤后,贮于棕色瓶中,置于4℃冰箱可保存2周。 (3)10%过硫酸铵,0.5g过硫酸铵溶于4ml水中,定容至5ml,应新配新用。 (4)10×TBE缓冲液(1 mol/L Tris,0.83mol/L 硼酸,10mmol/L EDTA): 121.1g Tris,51.35g硼酸,3.72g Na2 EDTA
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