- ￥16873.91
- Sigma-Aldrich
- 默克
- T8625-1KG
- 2026年09月10日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
试剂
- 保质期：
试剂
- 英文名：
-
- 库存：
有
- 供应商：
福州木辰
- CAS号：
72-19-5
- 规格：
T8625-1KG
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文献和实验STANDARD PLANT MOLECULAR BIOLOGY PROTOCOLS
mM dA,G,T 2 ea. 1mM dC 2 1M DTT 1 dCTP* 10 RT 6 inc 42C, 1h + 4M NaOH 15 10% SDS 7.5 0.25M EDTA 19 H2O 8.5 inc 37C 1h + 3ul Hac PCHCl3 ext separate from free nucs over G-50 column use106cpm
，使用的还原剂为0.1-5mM。EDTA为0.1-0.3 mM。去垢剂如Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂如尿素充分洗涤去除杂质,这一步很重要,因为大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 KDa)在4-8mol/L尿素中具有蛋白水解酶活性,在包涵体的溶解和复性过程中可导致重组蛋白质的降解。 对于尿素和盐酸胍的选择： 尿素和盐酸胍属中强度变性剂，易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用，所需浓度尿素8-10M，盐酸胍6-8M。尿素溶解包涵体较盐酸胍慢而弱，溶解度为70
剂等洗去包涵体表面吸附的大部分不溶性杂蛋白。洗涤液pH以与工程菌生理条件相近为宜，使用的还原剂为0.1-5mM。EDTA为0.1-0.3 mM。去垢剂如Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂如尿素充分洗涤去除杂质,这一步很重要,因为大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 KDa)在4-8mol/L尿素中具有蛋白水解酶活性,在包涵体的溶解和复性过程中可导致重组蛋白质的降解。 对于尿素和盐酸胍的选择： 尿素和盐酸胍属中强度变性剂，易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用
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