鸡蛋白磷酸酶2A（PP2A）ELISA检测试剂盒

鸡蛋白磷酸酶2A（PP2A）ELISA检测试剂盒

英文名称：Chicken Protein Phosphatase 2A (PP2A) ELISA Kit
检测原理：双抗体夹心法 ELISA。微孔板预包被鸡 PP2A 特异性捕获抗体，加入标准品 / 待测样本，再加入 HRP 标记检测抗体，形成固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体夹心复合物；TMB 底物显色，酸性终止液终止反应，酶标仪 450nm 测 OD 值，OD 与样本 PP2A 浓度正相关，通过标准曲线计算样本浓度。

仅供科研使用，不可用于临床诊断。

基础参数
- 货号：XK-E14791h
- 规格：48T / 96T
- 检测范围：125 pg/mL ~ 4000 pg/mL
- 最低检测限：＜10 pg/mL
- 精密度：板内 CV＜10%；板间 CV＜15%
- 回收率：85% ~ 115%
- 特异性：识别鸡天然 PP2A 与重组 PP2A，与同源结构蛋白无明显交叉反应
- 储存条件：2～8℃避光保存，有效期 6 个月，不可冷冻

适用样本类型
鸡血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆。

样本注意：含（NaN₃）样本会抑制 HRP 活性，禁止检测；样本短期可 2～8℃保存，长期分装 - 20℃，避免反复冻融。

试剂盒组分
1. 酶标包被板（预包被抗鸡 PP2A 抗体）
2. PP2A 标准品（冻干）
3. 标准品稀释液
4. 样本稀释液
5. HRP 标记抗鸡 PP2A 检测抗体
6. 20× 浓缩洗涤液
7. 底物 A 液、底物 B 液（TMB 显色）
8. 终止液（2M 硫酸）
9. 封板膜、说明书

简要操作流程
1. 试剂盒室温平衡 20 min，取出所需板条，剩余板条密封放回 2～8℃；
2. 设置空白孔、标准品孔、样本孔；标准品孔加梯度标准品，样本孔加稀释后待测样本；
3. 除空白孔，每孔加入 HRP 标记抗体，封板膜密封，37℃孵育 60 min；
4. 弃液洗板：洗涤液加满每孔，静置 1 min，甩干拍干，重复 5 次；
5. 加入底物 A、B 各 50 μL，37℃避光孵育 15 min；
6. 加入终止液 50 μL，酶标仪**450 nm**在 15 min 内读取 OD 值；
7. 标准曲线拟合，计算样本 PP2A 浓度。

样本要求
1. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2. 不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。