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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
鸡
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
鸡胶原酶Ⅰ(Collagenase Ⅰ)ELISA检测试剂盒
仅供科研实验使用,不可用于临床诊断
产品名称:鸡胶原酶Ⅰ(Collagenase Ⅰ)ELISA检测试剂盒
- 英文名称:Chicken Collagenase Ⅰ ELISA Kit
- 规格:48T / 96T
- 检测范围:1.25–40 ng/mL
- 最低检测限(灵敏度):<0.1 ng/mL
- 精密度:板内 CV<10%;板间 CV<15%
- 加标回收率:85%–115%
- 特异性:识别天然及重组鸡 Collagenase Ⅰ,与同源结构类似物无明显交叉反应
- 保存条件:2–8℃避光保存,严禁冷冻
- 有效期:6 个月
- 读板波长:主波长 450nm,推荐参比 630nm
适用样本类型
鸡血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等生物液体样本
试剂盒组分
1. 预包被酶标板(96 孔,可拆板条)
2. Collagenase Ⅰ 标准品(冻干)
3. 标准品稀释液
4. HRP 标记检测抗体工作液
5. 浓缩洗涤液(20×/30×)
6. TMB 底物 A 液、TMB 底物 B 液
7. 终止液(酸性)
8. 封板膜、说明书
简要操作流程
1. 标准品复溶并梯度稀释;样本预处理、离心去除沉淀
2. 每孔加入标准品 / 待测样本 100 μL;再加 HRP 标记抗体 100 μL,封板膜密封,37℃孵育 60 min
3. 弃液,洗板 5 次,拍干微孔
4. 底物 A、B 各 50 μL / 孔,37℃避光显色 15 min
5. 加终止液 50 μL / 孔,溶液由蓝变黄;15 min 内 450nm 测 OD 值
6. 绘制标准曲线,计算样本 Collagenase Ⅰ 浓度
样本处理要点
1. 血清:室温凝血,3000 rpm 离心 15 min,取上清;可分装 - 20℃冻存,避免反复冻融
2. 血浆:EDTA / 肝素抗凝,离心取上清;避免溶血
3. 组织匀浆:预冷 PBS 研磨,离心取上清,去除蛋白沉淀;高浓度样本需做梯度稀释
4. 细胞上清:离心去除细胞碎片,上清待测
注意事项
1. 所有试剂使用前平衡至室温;浓缩洗涤液低温如有结晶,温水溶解后再稀释
2. 建议标准品、样本设置复孔;空白孔用于调零
3. 底物避光保存,显色步骤全程避光
4. 终止液具有腐蚀性,操作做好防护
5. 仅科研用途,不能用于家禽临床诊断
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文献和实验鸡胶原酶Ⅰ(Collagenase Ⅰ)ELISA检测试剂盒
时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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