鸡α生育酚转运蛋白（TTPα）ELISA检测试剂盒

鸡α生育酚转运蛋白（TTPα）ELISA检测试剂盒

英文全称：Chicken α-tocopherol transfer protein (TTPα) ELISA Kit

仅用于科研实验，不可用于临床诊断

核心技术参数
- 规格：48T / 96T
- 检测范围：25 pg/mL ~ 800 pg/mL
- 最低检测灵敏度：＜1.0 pg/mL
- 精密度：
  - 板内变异系数 CV＜10%
  - 板间变异系数 CV＜15%
- 回收率：85%～115%
- 特异性：特异性识别鸡天然 / 重组 TTPα，与其他同源结构蛋白无明显交叉反应
- 保存条件：2～8℃避光密封保存，禁止冷冻
- 有效期：6 个月
- 读数波长：酶标仪 450 nm

适用样本类型
1. 血清：采血后 1000×g 离心 10 min 分离血清，避免溶血
2. 血浆：EDTA / 肝素 / 柠檬酸钠抗凝血浆，1000×g 离心
3. 组织匀浆：鸡肝、卵黄组织等，生理盐水匀浆，离心取上清
4. 细胞培养上清：1000×g 离心去除细胞碎片

试剂盒组分（96T）
1. 预包被鸡 TTPα 捕获抗体微孔板
2. 梯度 TTPα 标准品（冻干）
3. 生物素化检测抗体工作液
4. HRP 标记链霉亲和素
5. TMB 显色底物液 A、B
6. 终止液（2M H₂SO₄）
7. 浓缩洗涤液
8. 样本稀释液
9. 说明书、封板膜

简要实验原理
微孔板固相包被抗鸡 TTPα 捕获抗体；加入标准品 / 待测样本，样本中 TTPα 被捕获；洗板后加入生物素化检测抗体，形成**捕获抗体 - TTPα- 生物素化检测抗体**夹心复合物；洗涤后加入 HRP - 链霉亲和素；再次洗板，加入 TMB 底物显色；HRP 催化底物生成蓝色产物，加终止液转为黄色；450nm 测 OD 值，四参数拟合标准曲线，计算样本 TTPα 浓度。OD 值与 TTPα 浓度呈正相关。

参考操作流程
1. 标准品复溶，梯度稀释；样本按预实验比例稀释
2. 每孔加入标准品 / 样本 100 μL，封板，37℃孵育 90 min
3. 弃液洗板 3 次
4. 加入生物素化抗体工作液 100 μL，37℃孵育 60 min
5. 弃液洗板 3 次
6. HRP 链霉亲和素 100 μL，37℃避光孵育 30 min
7. 弃液洗板 5 次
8. TMB 底物 100 μL，37℃避光显色 10–20 min
9. 加入终止液 50 μL 终止反应，酶标仪 450 nm 读数

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。