鸡4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA检测试剂盒

鸡4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA检测试剂盒

用途：科研检测鸡样本中 4-HNE；4-HNE 是脂质过氧化关键产物，氧化应激标志物；不可用于临床诊断

基础信息
- 对象：4 - 羟基壬烯酸（4-HNE，4-Hydroxy-2E-nonenal）
- 种属：鸡（Chicken）
- 检测方法：夹心法
- 规格：48T / 96T
- 检测波长：酶标仪 450 nm
- 样本上样体积：50 μL / 孔
- 总实验时长：约 120 min（2 h）
- 检测范围：0.64–40 ng/mL
- 最低检测灵敏度：0.39 ng/mL
- 精密度：板内 CV＜10%；板间 CV＜10%
- 特异性：特异性识别鸡源 4-HNE，与结构类似物无显著交叉反应

检测原理
微孔板预包被 4-HNE 抗原。样本 / 标准品中的 4-HNE 与固相包被 4-HNE，竞争结合生物素标记抗 4-HNE 单抗；洗去未结合组分，加入 HRP 标记链霉亲和素；TMB 底物显色，加终止液转为黄色。样本中 4-HNE 浓度与 OD₄₅₀吸光度呈负相关，通过标准曲线计算浓度。

适用样本类型
鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清及其他生物体液

试剂盒组分
1. 预包被酶标板（96 孔）
2. 4-HNE 标准品
3. 标准品 / 样本稀释液
4. 生物素标记抗 4-HNE 抗体工作液
5. HRP - 链霉亲和素结合物
6. 洗涤缓冲液（20× 浓缩）
7. TMB 显色底物
8. 终止液
9. 封板膜、说明书

储存与运输
- 储存：2～8℃冷藏保存，严禁冷冻
- 运输：冰袋低温运输

操作简要流程
1. 试剂回温至室温，配制洗涤液，梯度稀释标准品
2. 加标准品 / 样本 50 μL，加入生物素抗体，温育
3. 洗板；加入 HRP 链霉亲和素，温育；洗板
4. TMB 避光显色；加终止液；酶标仪读取 450 nm OD 值
5. 四参数拟合标准曲线，计算样品 4-HNE 浓度

样本要求
1. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2. 不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。