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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
鸡
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
鸡沙门氏菌IgG抗体(SA IgG)ELISA检测试剂盒
仅供科研检测,不用于临床诊断
基本信息
- 产品名称:鸡沙门氏菌IgG抗体(SA IgG)ELISA检测试剂盒
- 检测方法:间接法 ELISA
- 规格:48T / 96T
- 保存条件:2‑8℃冷藏,禁止冷冻
- 有效期:6 个月
- 检测波长:酶标仪 450nm 读取 OD 值
- 用途:检测鸡血清 / 血浆中沙门氏菌特异性 IgG 抗体;用于鸡群沙门氏菌感染血清学筛查、流行病学调查、疫苗免疫抗体评估
实验原理
微孔板预先包被沙门氏菌抗原;加入待测样本,样本中沙门氏菌特异性 IgG 抗体结合固相抗原;洗板后加入 HRP 标记抗鸡 IgG 二抗;再次洗板,加入 TMB 底物显色;酸性终止液终止反应,溶液变为黄色。显色深浅与样本 SA‑IgG 抗体水平正相关,依据 OD 值判定阴阳性。
试剂盒组分
1. 预包被沙门氏菌抗原酶标板
2. 样本稀释液
3. 20× 浓缩洗涤液
4. HRP 标记抗鸡 IgG 结合物
5. TMB 显色液
6. 终止液
7. 阳性对照、阴性对照
8. 使用说明书
适用样本与样本处理
适用样本:鸡血清、血浆;也可用于卵黄、组织匀浆上清(科研)
1. 血清:全血室温静置 2h 或 4℃过夜,1000×g 离心 20min 取上清;避免溶血。
2. 血浆:EDTA / 肝素抗凝采集,1000×g 离心 15min 取上清。
3. 短期检测 4℃保存;长期分装‑20℃/‑80℃保存,冻融≤2 次。
4. 样本建议按说明书比例稀释后上样。
性能指标
- 阴阳性对照质控:阴性对照 OD<0.2;阳性对照 OD>0.8
- 精密度:板内 CV<10%;板间 CV<15%
- 特异性:识别鸡沙门氏菌特异性 IgG,与家禽常见其他病原无明显交叉反应
- 判定模式:定性阴阳性;Cut‑off 值 = 阴性对照平均 OD+0.25;样本 OD>Cut‑off 判阳性,反之阴性
简要操作流程
1. 试剂回温至室温,浓缩洗涤液稀释为工作液
2. 设置空白、阴性对照、阳性对照、待测样本孔,加入稀释后样本 / 对照
3. 37℃温育,洗板
4. 加入 HRP 酶结合物,37℃温育,洗板
5. 加入 TMB 底物,37℃避光显色
6. 加入终止液,450nm 读取 OD 值,计算判读结果
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
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文献和实验鸡沙门氏菌IgG抗体(SA IgG)ELISA检测试剂盒
时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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