鸡抗角蛋白抗体（AKA）ELISA检测试剂盒

鸡抗角蛋白抗体（AKA）ELISA检测试剂盒

仅供科研实验使用，不可用于临床诊断

基础信息
- 对象：鸡抗角蛋白抗体（Chicken Anti‑Keratin Antibody，AKA）
- 检测方法：夹心法
- 规格：48T / 96T
- 样本类型：鸡血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆上清等生物体液
- 检测波长：酶标仪 450 nm
- 储存条件：2‑8℃密封避光保存，禁止冷冻
- 有效期：6 个月

检测原理
微孔板预先包被角蛋白抗原；加入标准品 / 待测样本，样本中 AKA 与固相抗原结合；洗涤去除未结合物质，加入 HRP 标记抗鸡 IgG 检测抗体，形成固相抗原‑AKA‑HRP 标记抗体免疫复合物；加入 TMB 底物显色，HRP 催化底物生成蓝色产物；终止液（硫酸）终止反应转为黄色；OD450 吸光度与样本 AKA 浓度正相关；通过标准曲线计算样本 AKA 含量。

核心性能指标
- 检测范围：3.125‑100 ng/mL
- 最低检测灵敏度：＜0.1 ng/mL
- 重复性：板内 CV＜10%；板间 CV＜15%
- 回收率：85‑115%
- 线性：标准曲线相关系数 R≥0.990
- 特异性：识别天然、重组鸡 AKA，与结构类似物无明显交叉反应

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

简要实验流程
1. 试剂盒、样本室温平衡 30‑60 min；
2. 设置标准品孔、样本孔、空白孔；样本按比例稀释上样；
3. 加入 HRP 标记检测抗体，封板膜密封，37℃温育 60 min；
4. 洗板 5 次，拍干；
5. 每孔加入底物 A、B 各 50 μL，37℃避光显色 10‑15 min；
6. 加入终止液 50 μL，立即酶标仪读取 450 nm OD 值；
7. 标准曲线拟合，计算样本 AKA 浓度。

样本采集与保存
1. 血清：采血后静置，离心分离血清，避免溶血；
2. 血浆：EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝均可；1000×g 离心去除沉淀；
3. 短期：2‑8℃可保存≤3 天；长期分装‑20℃冻存，避免反复冻融；
4. 浑浊样本建议离心取上清再检测。

注意事项
1. 终止液含强酸，操作做好防护；
2. 底物避光保存，显色前避免强光；
3. 浓缩洗涤液低温出现结晶，温水溶解后再稀释；
4. 未用完板条密封放回铝箔袋 2‑8℃保存；
5. 所有耗材、试剂仅用于科研，不用于动物临床诊断。