鸡二酰甘油胆碱磷酸转移酶（CPT）ELISA检测试剂盒

鸡二酰甘油胆碱磷酸转移酶（CPT）ELISA检测试剂盒

英文全称：Chicken diacylglycerol choline phosphotransferase（CPT，CHPT1）ELISA Kit

仅供科研使用，不可用于临床诊断

基本信息
- 检测方法：双抗体一步夹心法 ELISA
- 规格：48T / 96T
- 保存条件：2‑8℃避光保存，禁止冷冻
- 有效期：6 个月
- 读板条件：酶标仪 450nm

检测用途
检测鸡样本中二酰甘油胆碱磷酸转移酶（CPT）含量
适用样本：血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、各类禽类生物体液。

试剂盒组分
1. 预包被抗‑鸡‑CPT 抗体酶标板
2. CPT 标准品
3. HRP 标记检测抗体
4. 样本稀释液、抗体稀释液
5. TMB 显色底物液 A、B
6. 终止液（酸性）
7. 浓缩洗涤液（20×）
8. 说明书、封板膜

简要实验原理
微孔板固相预包被鸡 CPT 捕获抗体；加入标准品 / 待测样本，再加入 HRP 标记检测抗体，孵育形成固相抗体‑CPT 抗原‑HRP 标记抗体夹心复合物；充分洗板去除未结合组分；加入 TMB 底物显色，HRP 催化底物变为蓝色；加终止液转为黄色；450nm 读取 OD；OD 值与样本 CPT 浓度正相关，标准曲线计算样本浓度。

样本处理要点
1. 血清：采血后避免溶血，1000×g 离心 10 min，分离血清，‑20℃分装冻存，避免反复冻融。
2. 血浆：EDTA、肝素、柠檬酸钠抗凝均可；1000×g 离心 30 min 取上清。
3. 组织匀浆：组织按重量加生理盐水 / PBS 匀浆，1000‑3000 g 离心取上清检测。
4. 细胞上清：离心去除细胞沉淀后取上清；浑浊样本建议先过滤。

短期 4℃保存不超过 24h；长期‑20℃；避免‑80℃反复冻融。

操作简要流程
1. 试剂盒室温平衡 20‑30 min，配制洗涤液，复溶标准品并梯度稀释。
2. 设置空白孔、标准孔、样本孔；加入标准品、待测样本。
3. 加入 HRP 标记抗体，封板，37℃温育 60 min。
4. 洗板 5 次。
5. 加入 TMB 底物，37℃避光显色 15‑20 min。
6. 加入终止液，450nm 立即测 OD 值。
7. 绘制标准曲线，计算样本 CPT 浓度。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。