鸡脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）ELISA检测试剂盒

鸡脂肪甘油三酯脂酶（ATGL）ELISA检测试剂盒

英文名称：Chicken Adipose Triglyceride Lipase (ATGL) ELISA Kit
别名：PNPLA2；脂肪甘油三酯脂肪酶；主要参与禽类脂肪动员、脂解代谢研究，仅供科研使用，不可用于临床诊断

基础规格
- 规格：48T / 96T
- 检测方法：双抗体夹心法
- 检测物种：鸡（Gallus）
- 靶标：ATGL（脂肪甘油三酯脂酶）
- 检测波长：450 nm（酶标仪）
- 保存条件：2‑8℃避光保存，冰袋运输；严禁冷冻
- 有效期：6 个月

适用样本类型
鸡血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液、脂肪组织裂解液等生物样本

样本预处理要点：血清 / 血浆：采集后静置，4 ℃、1000 × g 离心 15 min 取上清；组织样本需冰上匀浆，离心去除沉淀后取上清检测，样本可‑20 ℃分装冻存，避免反复冻融。

检测原理
微孔板预先包被鸡 ATGL 捕获抗体；加入标准品 / 待测样本，样本中 ATGL 与固相捕获抗体结合；洗板后加入 HRP 标记 ATGL 检测抗体，形成固相抗体‑ATGL 抗原‑HRP 标记抗体夹心复合物；洗去未结合组分；加入 TMB 底物显色，HRP 催化底物生成蓝色产物；加入终止液变为黄色；450 nm 读取 OD 值，OD 值与样本 ATGL 浓度成正比，通过标准曲线计算样本浓度。

试剂盒组分
1. 预包被 ATGL 抗体酶标板
2. ATGL 标准品
3. 标准品稀释液、样本稀释液
4. HRP‑标记检测抗体工作液
5. 浓缩洗涤液
6. TMB 显色底物液
7. 终止液
8. 封板膜、说明书

简要操作流程
1. 试剂回温至室温，配制工作液；设置空白孔、标准孔、样本孔
2. 每孔加入标准品 / 样本 100 μL，封板膜密封，37 ℃孵育 90 min
3. 弃液洗板 5 次
4. 加入 HRP 酶标抗体 100 μL，37 ℃孵育 60 min；洗板 5 次
5. 加入 TMB 底物 90 μL，37 ℃避光显色 15‑20 min
6. 加终止液 50 μL 终止反应
7. 15 min 内酶标仪 450 nm 读数，拟合标准曲线计算样本 ATGL 浓度

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。