hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞）

一、产品概述

hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因敲除稳转细胞株，宿主/载体细胞为 THP-1。该产品基于 "hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。

二、产品名称与长尾关键词

核心检索词：hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因敲除细胞株、hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） knockout cell line、THP-1 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） KO、hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 稳转细胞、CRISPR hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因敲除、hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 功能研究模型。

三、核心参数

四、产品特点

• hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 靶向基因敲除，构建与鉴定围绕该基因位点展开
• 以 THP-1 为宿主背景，便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
• 组织来源 外周血，适配相应组织背景的功能与机制研究
• 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
• 冻存管/培养瓶两种规格可选，适配不同实验通量
• 敲除靶位点明确，便于后续设计引物自行复核基因型
• 适用于信号通路上下游关系解析与遗传互作筛选

五、适用范围

本 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因敲除稳转细胞株主要用于 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因功能缺失（loss-of-function）研究，通过表型对比解析 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 的生物学功能与调控机制；适用于 rescue 回补实验（回补野生型验证表型归因）、信号通路解析、药物靶点确证与慢病毒包装等场景。宿主细胞 THP-1 便于在熟悉背景下开展机制研究。

六、构建与验证原理

采用 CRISPR/Cas9 系统针对 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因外显子设计 sgRNA，由 Cas9 核酸酶引入 DNA 双链断裂（DSB），细胞经非同源末端连接（NHEJ）修复时产生移码性插入/缺失（indel），使 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 阅读框提前终止，实现稳定敲除。单克隆经 PCR 扩增靶区段并 Sanger 测序鉴定等位基因突变，确认敲除效率后连续传代验证表型稳定性（THP-1 背景，货号 SHA-KO-0592）。

七、细胞培养方案建议

1. 复苏：复苏时先将完全培养基预温至 37℃，冻存管快速水浴解冻后直接将内容物滴入培养基，100×g 离心 5 分钟，弃含 DMSO 上清，以新鲜培养基重悬后按 THP-1 适宜密度接种于培养瓶，置 37℃、5% CO₂ 培养箱，次日观察贴壁情况并换液。
2. 培养条件：培养基以 10% FBS 完全培养基为主，可视需要加入双抗防止污染；THP-1 常规每 2–3 天换液，换液前后观察培养基颜色与 pH 变化，及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代：贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化：弃培养液，PBS 轻洗 1–2 次，加入 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 孵育 1–3 分钟（镜下见细胞变圆、间隙增大即终止），加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁，100×g 离心 5 分钟收集细胞，按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异，避免过度消化。
4. 倍增与接种：多数肿瘤细胞系群体倍增时间约 18–36 小时、正常细胞系约 24–48 小时（以具体细胞系特性为准）；建议汇合度达 80–90% 时传代，避免过度汇合导致分化或凋亡。
5. 冻存：冻存取对数期细胞，冻存液推荐 90% FBS + 10% DMSO 或商业无血清冻存液，细胞密度 1–3×10⁶ cells/mL，程序降温盒 -80℃ 阶梯降温过夜后转入液氮长期保存，避免 4℃ 以上长时间停留造成冰晶损伤。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 的基因敲除状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 THP-1 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。

八、保存与运输

规格 T25/冻存管 对应冻存管交付（货号 SHA-KO-0592）。冻存管建议液氮（-196℃）长期保存，短期可于 -80℃ 暂存，4℃ 暂存不超过 48 小时；运输使用干冰保温，全程避免剧烈震荡与温度回升；hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 基因敲除株到货后请优先复苏或液氮保存，保障后续 THP-1 细胞实验的可重复性。

九、常见问题（FAQ）

• hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 敲除后是否完全无蛋白表达？
  CRISPR/Cas9 移码敲除通常导致功能蛋白缺失，但需以 Western blot 在本实验体系中实测确认；建议用识别不同表位的抗体验证 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 蛋白水平，并关注是否存在截短产物。
• hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 敲除是否经过验证？
  是。本 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 敲除株（THP-1）交付前经靶位点 PCR 扩增与 Sanger 测序鉴定，确认移码突变与敲除等位基因，并提供相应验证说明。
• 传代比例与消化时间如何把握？
  贴壁细胞常规按 1:3–1:6 传代，0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，以细胞变圆、脱壁为准，避免过度消化；具体比例依细胞生长速率微调。
• 发货周期与运输方式？
  按平台公示的交期发货，冻存管以干冰、培养瓶以冰袋运输；具体时效受库存与目的地影响，请以下单信息为准。
• 能否用于体内实验？
  本产品为体外科研用稳转细胞株，仅供科研，不用于临床、诊断或治疗；体内使用需自行评估合规性。

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十一、产品质控与售后

本产品由 上海淳麦生物科技有限公司 提供，敲除株附靶位点 PCR 扩增与 Sanger 测序验证说明（确认移码突变与敲除等位基因），交付时随附技术资料，说明基因敲除株的鉴定方式与结果解读。产品仅供科研使用；收货后请尽快复苏或液氮保存，如对 hTARM1基因敲除细胞株（THP-1细胞） 稳转株（货号 SHA-KO-0592）的细胞状态或验证结果有疑问，请在签收后规定时间内联系售后处理。