- ￥6980
- 上海淳麦
- 上海
- SHA-OE-2230
- 2026年09月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
U251MG细胞ATG4A基因过表达细胞株
- 库存：
10000
- 供应商：
上海淳麦
- 组织来源：
胶质瘤
- 物种来源：
人
- 器官来源：
胶质瘤
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
T25/冻存管
一、产品概述
U251MG细胞ATG4A基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 ATG4A 基因过表达稳转细胞株，宿主/载体细胞为 U251MG。该产品基于 "ATG4A 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词：ATG4A 基因过表达细胞株、ATG4A overexpression cell line、U251MG ATG4A OE、ATG4A 稳转细胞、CRISPR ATG4A 基因过表达、ATG4A 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | U251MG细胞ATG4A基因过表达细胞株 |
| 商品货号 | SHA-OE-2230 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 胶质瘤 |
| 器官来源 | 胶质瘤 |
| 宿主/载体细胞 | U251MG |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- ATG4A 靶向基因过表达，构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 U251MG 为宿主背景（人胶质瘤），便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 胶质瘤，适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
- 可用于蛋白互作（Co-IP / Pull-down）与亚细胞定位研究
- 适用于药物敏感性评价与化合物筛选中的靶点高表达模型
- 过表达水平经 qPCR 与 Western blot 双重验证
五、适用范围
本 ATG4A 基因过表达稳转细胞株主要用于 ATG4A 基因功能获得（gain-of-function）研究，通过稳定上调 ATG4A 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号；适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 U251MG（人胶质瘤） 适用于相应组织来源相关研究。
六、构建与验证原理
ATG4A 稳定过表达模型（货号 SHA-OE-2230）通过慢病毒介导的基因组整合实现：重组载体携带 ATG4A 编码序列与筛选标记，感染 U251MG 细胞后经药筛富集阳性克隆并单克隆化。阳性株以 qPCR（mRNA 水平）与 Western blot（蛋白水平）验证 ATG4A 上调幅度，确保后续功能实验的表达基础可靠。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏：冻存管自液氮取出后立即置 37℃ 水浴快速解冻（约 1–2 分钟，至仅余少量冰晶），75% 酒精擦拭管口，将悬液转入含预温完全培养基的离心管，100×g 离心 5 分钟去除冻存保护剂（DMSO），弃上清后重悬并接种于 T25 培养瓶（U251MG 建议 1–3×10⁵ cells/cm²），置 37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱。
2. 培养条件：培养基以 10% FBS 完全培养基为主，可视需要加入双抗防止污染；U251MG 常规每 2–3 天换液，换液前后观察培养基颜色与 pH 变化，及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代：U251MG 贴壁株建议汇合度 80%–90% 时传代：PBS 洗涤、0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，镜下确认变圆脱壁后以完全培养基终止，离心去酶液，按 1:3–1:6 比例接种；对消化敏感的细胞可采用低浓度胰酶或室温消化。
4. 倍增与接种：多数肿瘤细胞系群体倍增时间约 18–36 小时、正常细胞系约 24–48 小时（以具体细胞系特性为准）；建议汇合度达 80–90% 时传代，避免过度汇合导致分化或凋亡。
5. 冻存：选择对数期、活力良好的 U251MG 细胞冻存，密度 1–3×10⁶ cells/mL，冻存液可用 90% FBS + 10% DMSO；经程序降温（约 -1℃/min）至 -80℃ 过夜后入液氮，可显著提高复苏存活率。
6. 状态复核：建议建立低代次种子库：U251MG 细胞扩增后分批冻存，实验统一使用相近代次，并在关键节点复核 ATG4A 基因过表达株的基因型或表达量，减少遗传漂变带来的批间差异。
八、保存与运输
交付形式为冻存管（货号 SHA-OE-2230）。冻存管建议液氮（-196℃）长期保存，短期可于 -80℃ 暂存，4℃ 暂存不超过 48 小时；产品通过干冰冷链运输，签收后请及时转入液氮或按培养方案复苏；ATG4A 稳转株应尽量避免反复冻融，以维持 U251MG 细胞中目标基因的稳定表达与表型。
九、常见问题（FAQ）
- 过表达倍数大概是多少？
过表达幅度受 ATG4A 本身表达背景与 U251MG 细胞类型影响，不同靶标差异较大；具体倍数以随货验证说明为准，建议在自有实验体系内以 qPCR/WB 定量确认。 - 能否诱导表达或调控表达强度？
本株为组成型稳定过表达株。若需诱导或梯度调控 ATG4A 表达，可考虑更换诱导型载体系统另行构建。 - 收到后发现细胞状态不佳怎么办？
请先核对运输包装与到货温度，拍照留存并尽快联系售后；同时按复苏方案处理，避免长时间置于非适宜温度。 - 如何判断与处理支原体污染？
建议每 1–2 月用 PCR 法筛查支原体；一旦阳性应丢弃并彻底消毒超净台与培养箱，必要时以支原体清除试剂处理周边细胞，避免交叉传播影响实验。 - 传代比例与消化时间如何把握？
贴壁细胞常规按 1:3–1:6 传代，0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，以细胞变圆、脱壁为准，避免过度消化；具体比例依细胞生长速率微调。
十、相关产品推荐
· ATG4A 基因敲除稳转株（loss-of-function 对照）
· 空载体对照稳转株
· 野生型 U251MG 细胞株（阴性对照）
· ATG4A 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· qPCR / Western blot 验证试剂
十一、产品质控与售后
上海淳麦生物科技有限公司 交付的 ATG4A 基因过表达稳转株（货号 SHA-OE-2230）过表达株附 qPCR 与 Western blot 表达水平验证说明，本产品面向科研实验，不用于人体。如到货后 U251MG 细胞状态异常或与随附说明不符，请保留原包装并与售后沟通，我们将按售后流程处理。
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文献和实验大小检出（用抗报告基因或抗目的蛋白抗体）； 功能验证：融合表达务必证明报告标签不影响蛋白原有功能（定位、互作、表型均正常）。 4. 冻存复检 每株至少冻存 6 支，复苏一支确认荧光维持和细胞状态后方可交付或使用。 --- 四、Luciferase 稳转株的特殊注意点 体内成像用的 Luciferase 稳转株有几个额外考量： 信号强度与细胞数线性相关：建株时应验证发光值与细胞数量的线性范围； 均一性要求高：用于动物实验的 luciferase 株建议用单克隆，避免混合克隆中低表达细胞稀释信号
1）Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新，针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新，出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术，不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势，广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株，用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点，高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶（Flp）和定点重组技术，将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
想长期表达某个基因，但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统： Tet 诱导稳定细胞株（Tet-On）怎么构建？和普通稳转株差在哪？诱导倍数怎么验证？ 先说结论： Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统：细胞先稳定表达调控蛋白（Tet-On 的 rtTA），再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达，加入诱导剂（多西环素 doxycycline）后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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