SKOV3细胞AGAP6基因过表达细胞株

一、产品概述

SKOV3细胞AGAP6基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 AGAP6 基因过表达稳转细胞株，宿主/载体细胞为 SKOV3。该产品基于 "AGAP6 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。

二、产品名称与长尾关键词

核心检索词：AGAP6 基因过表达细胞株、AGAP6 overexpression cell line、SKOV3 AGAP6 OE、AGAP6 稳转细胞、CRISPR AGAP6 基因过表达、AGAP6 功能研究模型。

三、核心参数

四、产品特点

• AGAP6 靶向基因过表达，构建与鉴定围绕该基因位点展开
• 以 SKOV3 为宿主背景（人卵巢癌），便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
• 组织来源 卵巢腺癌，腹水转移，适配相应组织背景的功能与机制研究
• 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
• 提供空载体对照株选项，便于排除载体背景效应
• 过表达水平经 qPCR 与 Western blot 双重验证
• 适用于药物敏感性评价与化合物筛选中的靶点高表达模型

五、适用范围

本 AGAP6 基因过表达稳转细胞株主要用于 AGAP6 基因功能获得（gain-of-function）研究，通过稳定上调 AGAP6 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号；适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 SKOV3（人卵巢癌） 适用于相应组织来源相关研究。

六、构建与验证原理

AGAP6 稳定过表达模型（货号 SHA-OE-1557）通过慢病毒介导的基因组整合实现：重组载体携带 AGAP6 编码序列与筛选标记，感染 SKOV3 细胞后经药筛富集阳性克隆并单克隆化。阳性株以 qPCR（mRNA 水平）与 Western blot（蛋白水平）验证 AGAP6 上调幅度，确保后续功能实验的表达基础可靠。

七、细胞培养方案建议

1. 复苏：自液氮取出 AGAP6 基因过表达株冻存管，37℃ 水浴轻柔晃动至完全融化，转入预温培养基后 100×g 离心 5 分钟洗去 DMSO，重悬接种（SKOV3 常规 1–3×10⁵ cells/cm²），于 37℃、5% CO₂ 条件下静置培养，24 小时后首次换液以去除未贴壁细胞与碎片。
2. 培养条件：完全培养基建议含 10% FBS，SKOV3 细胞每 2–3 天换液，换液时保留部分条件培养基有助于细胞适应，具体血清比例可按细胞状态在 5%–10% 间调整。
3. 传代：贴壁细胞传代采用胰蛋白酶消化：弃培养液，PBS 轻洗 1–2 次，加入 0.25% Trypsin-EDTA，37℃ 孵育 1–3 分钟（镜下见细胞变圆、间隙增大即终止），加入含 10% FBS 的完全培养基终止消化并吹打脱壁，100×g 离心 5 分钟收集细胞，按 1:3–1:6 接种于新培养瓶。消化时间因细胞系而异，避免过度消化。
4. 倍增与接种：SKOV3 常规每 2–4 天传代一次，具体依倍增时间（多数 18–48 小时）与接种密度调整；长期过度汇合会改变细胞形态与基因表达谱，应及时分瓶。
5. 冻存：选择对数期、活力良好的 SKOV3 细胞冻存，密度 1–3×10⁶ cells/mL，冻存液可用 90% FBS + 10% DMSO；经程序降温（约 -1℃/min）至 -80℃ 过夜后入液氮，可显著提高复苏存活率。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 AGAP6 的基因过表达状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 SKOV3 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。

八、保存与运输

规格 T25/冻存管 对应冻存管交付（货号 SHA-OE-1557）。冻存管收到后若暂不复苏，应立即转入液氮保存，切勿在 -20℃ 或 4℃ 长时间放置；运输使用干冰保温，全程避免剧烈震荡与温度回升；AGAP6 基因过表达株到货后请优先复苏或液氮保存，保障后续 SKOV3 细胞实验的可重复性。

九、常见问题（FAQ）

• 过表达倍数大概是多少？
  过表达幅度受 AGAP6 本身表达背景与 SKOV3 细胞类型影响，不同靶标差异较大；具体倍数以随货验证说明为准，建议在自有实验体系内以 qPCR/WB 定量确认。
• 能否诱导表达或调控表达强度？
  本株为组成型稳定过表达株。若需诱导或梯度调控 AGAP6 表达，可考虑更换诱导型载体系统另行构建。
• 复苏后细胞不贴壁或大量死亡？
  多为冻存损伤或 DMSO 毒性所致，建议提高接种密度（1–3×10⁵ cells/cm²）、缩短水浴时间、充分离心去除 DMSO；若持续不贴壁，排查支原体污染或血清批次适配性。
• 传代比例与消化时间如何把握？
  贴壁细胞常规按 1:3–1:6 传代，0.25% 胰酶 37℃ 消化 1–3 分钟，以细胞变圆、脱壁为准，避免过度消化；具体比例依细胞生长速率微调。
• 是否有对照株？
  可提供空载体/野生型对照株或对应过表达/敲除配对株（见相关产品），便于设置实验对照。

十、相关产品推荐

· AGAP6 基因敲除稳转株（loss-of-function 对照）
· 空载体对照稳转株
· 野生型 SKOV3 细胞株（阴性对照）
· AGAP6 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· qPCR / Western blot 验证试剂

十一、产品质控与售后

本产品由 上海淳麦生物科技有限公司 提供，过表达株附 qPCR 与 Western blot 表达水平验证说明，交付时随附技术资料，说明基因过表达株的鉴定方式与结果解读。产品仅供科研使用；收货后请尽快复苏或液氮保存，如对 AGAP6 稳转株（货号 SHA-OE-1557）的细胞状态或验证结果有疑问，请在签收后规定时间内联系售后处理。