- ￥5980
- 上海淳麦
- 上海
- SHA-OE-0066
- 2026年09月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
A549细胞AK8基因过表达细胞株
- 库存：
10000
- 供应商：
上海淳麦
- 组织来源：
肺
- 物种来源：
人
- 器官来源：
肺
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
T25/冻存管
一、产品概述
A549细胞AK8基因过表达细胞株 是 上海淳麦生物科技有限公司 构建的 AK8 基因过表达稳转细胞株，宿主/载体细胞为 A549。该产品基于 "AK8 功能研究" 需求定向构建，即购即用，可显著缩短研究者自行构建基因编辑细胞株的周期（常规自建需 2-4 个月）。
二、产品名称与长尾关键词
核心检索词：AK8 基因过表达细胞株、AK8 overexpression cell line、A549 AK8 OE、AK8 稳转细胞、CRISPR AK8 基因过表达、AK8 功能研究模型。
三、核心参数
| 产品名称 | A549细胞AK8基因过表达细胞株 |
| 商品货号 | SHA-OE-0066 |
| 品牌 | 上海淳麦 |
| 细胞规格 | T25/冻存管 |
| 种属来源 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 组织来源 | 肺 |
| 器官来源 | 肺 |
| 宿主/载体细胞 | A549 |
| 产地 | 上海 |
| 供应商 | 上海淳麦生物科技有限公司 |
四、产品特点
- AK8 靶向基因过表达，构建与鉴定围绕该基因位点展开
- 以 A549 为宿主背景（人肺腺癌），便于在熟悉细胞体系中开展机制研究
- 组织来源 肺，适配相应组织背景的功能与机制研究
- 冻存管规格发货，复苏后即可进入实验，便于批次管理与保种
- 适用于基因功能、互作与信号通路研究中的过表达模型
- 可与同靶点敲除株配对使用，形成功能获得/缺失对照
- 过表达水平经 qPCR 与 Western blot 双重验证
五、适用范围
本 AK8 基因过表达稳转细胞株主要用于 AK8 基因功能获得（gain-of-function）研究，通过稳定上调 AK8 表达解析其蛋白功能、互作网络与下游信号；适用于重组蛋白表达、病毒包装、细胞模型构建与药物敏感性评价等。宿主细胞 A549（人肺腺癌） 适用于相应组织来源相关研究。
六、构建与验证原理
采用慢病毒或质粒载体将 AK8 基因编码区（CDS）稳定整合至 A549 细胞基因组，经抗生素筛选与单克隆扩增获得稳转株；整合后目标基因随细胞分裂稳定遗传，表达水平经 qPCR 与 Western blot 双重验证。该路线可长期维持 AK8 高表达，适合功能获得研究与蛋白生产（货号 SHA-OE-0066）。
七、细胞培养方案建议
1. 复苏：复苏时先将完全培养基预温至 37℃，冻存管快速水浴解冻后直接将内容物滴入培养基，100×g 离心 5 分钟，弃含 DMSO 上清，以新鲜培养基重悬后按 A549 适宜密度接种于培养瓶，置 37℃、5% CO₂ 培养箱，次日观察贴壁情况并换液。
2. 培养条件：培养基以 10% FBS 完全培养基为主，可视需要加入双抗防止污染；A549 常规每 2–3 天换液，换液前后观察培养基颜色与 pH 变化，及时剔除异常孔/瓶。
3. 传代：传代时弃旧液、PBS 洗涤后以 0.25% Trypsin-EDTA 37℃ 消化，A549 通常 1–3 分钟即可脱壁；含血清培养基终止后轻柔吹打成单细胞悬液，离心重悬并按 1:3–1:6 分瓶，吹打力度不宜过大以免机械损伤。
4. 倍增与接种：倍增时间因细胞系而异（常见肿瘤系 18–36 小时），建议 A549 维持在对数期、汇合度不超过 90%，以防止接触抑制与状态漂移。
5. 冻存：冻存前确保细胞处于对数期且无污染，按 1–3×10⁶ cells/mL 重悬于含 10% DMSO 的冻存液，分装后程序降温过夜再转入液氮；标注 AK8 基因过表达株、代次与日期便于追溯。
6. 状态复核：连续传代 5–10 代后建议复核 AK8 的基因过表达状态（敲除株以 PCR/测序、过表达株以 qPCR/WB），确认 A549 细胞中目标位点/表达水平未发生漂变。
八、保存与运输
本产品（AK8 基因过表达株，货号 SHA-OE-0066）以冻存管形式交付。冻存管请直接置于液氮气相或液相中长期保存，避免 -80℃ 久置导致活力下降；运输采用干冰保温并全程冷链，到货后请尽快按第七部分方案复苏或转入液氮保存，避免反复冻融影响 A549 细胞活性与 AK8 编辑状态。
九、常见问题（FAQ）
- 能否诱导表达或调控表达强度？
本株为组成型稳定过表达株。若需诱导或梯度调控 AK8 表达，可考虑更换诱导型载体系统另行构建。 - 长期传代后 AK8 表达会衰减吗？
稳转株表达盒整合于基因组，一般较稳定；但长期传代仍可能出现表达漂移，建议控制代次并定期以 qPCR/WB 复核 AK8 表达水平。 - 如何判断与处理支原体污染？
建议每 1–2 月用 PCR 法筛查支原体；一旦阳性应丢弃并彻底消毒超净台与培养箱，必要时以支原体清除试剂处理周边细胞，避免交叉传播影响实验。 - 与自建细胞株相比优势？
即购即用，省去 2-4 个月自建与验证周期，批次一致性更可控。 - 是否提供培养基与转染试剂配套？
本产品为细胞株，配套完全培养基、冻存液、支原体检测试剂与转染试剂可另行采购（见相关产品推荐）。
十、相关产品推荐
· AK8 基因敲除稳转株（loss-of-function 对照）
· 空载体对照稳转株
· 野生型 A549 细胞株（阴性对照）
· AK8 相关抗体与 ELISA 试剂盒（检测表达/功能）
· qPCR / Western blot 验证试剂
十一、产品质控与售后
关于 AK8 基因过表达株（A549，货号 SHA-OE-0066）：过表达株随货说明给出目标基因表达水平的检测方式与结果判读，随货技术资料载明鉴定方法与判读标准。产品科研专用；运输保温、收货复苏与售后时效按平台规则执行，具体疑问可联系售后咨询。
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文献和实验大小检出（用抗报告基因或抗目的蛋白抗体）； 功能验证：融合表达务必证明报告标签不影响蛋白原有功能（定位、互作、表型均正常）。 4. 冻存复检 每株至少冻存 6 支，复苏一支确认荧光维持和细胞状态后方可交付或使用。 --- 四、Luciferase 稳转株的特殊注意点 体内成像用的 Luciferase 稳转株有几个额外考量： 信号强度与细胞数线性相关：建株时应验证发光值与细胞数量的线性范围； 均一性要求高：用于动物实验的 luciferase 株建议用单克隆，避免混合克隆中低表达细胞稀释信号
1）Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新，针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新，出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术，不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势，广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株，用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点，高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶（Flp）和定点重组技术，将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
想长期表达某个基因，但它一高表达细胞就死、一过表达表型全是"中毒"——这时候很多老师会想到诱导表达系统： Tet 诱导稳定细胞株（Tet-On）怎么构建？和普通稳转株差在哪？诱导倍数怎么验证？ 先说结论： Tet 诱导稳转株的核心是把"表达开关"装进稳转系统：细胞先稳定表达调控蛋白（Tet-On 的 rtTA），再引入由 TRE 应答元件控制的目的基因。平时不表达或低表达，加入诱导剂（多西环素 doxycycline）后才按剂量诱导表达。构建框架仍是"感染 → 筛选 → 验证 → 冻存
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