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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
有效期1-3个月
- 英文名:
抗凝小鼠血|无菌|现货
- 库存:
99
- 供应商:
北京伊塔生物科技有限公司
- 规格:
100ml
抗凝小鼠血|无菌|现货,货号:YTQ2638-6,储存温度:2-8℃,有效期:有效期1-3个月。
抗凝小鼠血
红细胞:无核,小鼠血液极易凝固,采血后需快速轻柔混匀抗凝剂。
抗凝剂、用途、方法
① EDTA‑K₂抗凝(最常用)
✅用途:血常规、血细胞计数、流式细胞检测,ACK 裂解获取白细胞 ❌不能用于凝血实验、钙离子检测 方法:1.5‑2 mg EDTA‑K₂ /1 mL 全血;EP 管预加抗凝剂,采血后轻柔颠倒 5‑8 次混匀;4℃ 1000‑1500 g 离心 10‑15 min,取上清得到血浆。
② 肝素抗凝
✅用途:PBMC 外周血单个核细胞分离、部分细胞实验 ❌不能用于凝血检测,会抑制 PCR 方法:20‑30 U 肝素 /1 mL 全血,采血后轻柔混匀。
③ 3.2% 枸橼酸钠抗凝
✅用途:凝血、血小板功能实验 ❌不能测钙、不适合血常规流式 方法:抗凝剂∶全血 = 1∶9;凝血样本室温 1500 g 离心 15 min,不要 4℃离心。
血浆 vs 血清
- 血浆:加抗凝剂后离心上清
- 血清:不加抗凝剂,血液自然凝固后离心上清
ACK 裂解制备白细胞(EDTA 抗凝全血)
抗凝小鼠全血加入 ACK 裂解液,室温裂解 3‑5 min;PBS 终止裂解,离心收集白细胞沉淀,用于流式。
关键注意
- 禁止剧烈涡旋,防止溶血、血小板活化;出现凝块样本作废。
- 动物实验遵守动物伦理。
简答版(考试直接背)
抗凝小鼠血:小鼠红细胞无核。 EDTA‑K₂抗凝用于血常规、流式;肝素用于分离单个核细胞;枸橼酸钠用于凝血实验。采血后迅速轻柔颠倒混匀,抗凝离心得到血浆;可用 ACK 裂解红细胞获得白细胞。
如何判断小鼠血液是否凝固
肉眼观察(最常用,实验现场判断)
- 可见凝块、絮状物:管底 / 管壁出现白色、红色胶冻样小块、丝絮,就是已经凝固。哪怕很小的凝块,样本直接废弃。
- 流动性消失:轻轻倾斜 EP 管,血液不再流动,呈半固体胶状,已经凝固。
- 出现分层:管内析出淡黄色清亮液体(血清),下层是红色血块,说明完全凝固。
✅正常合格抗凝血:液体均匀红色,无絮、无结块,倾斜试管可以顺畅流动。
离心后判断
- 抗凝合格:上层淡黄色血浆,下层紧实红细胞沉淀,中间薄薄一层白膜(白细胞血小板),管底管壁无胶状血块。
- 已经凝固:离心后底部出现大块胶冻样血块,血浆少,伴随絮状漂浮物。
小提示
- 小鼠血凝固速度很快,采血混匀不充分,几十秒就会产生微小凝块,肉眼有时候小凝块不容易看见;如果后续实验出现堵枪头、流式堵管,大概率存在微凝块。
- ❗出现任何凝块,样本不能用于后续实验(血常规、凝血、流式全部受干扰),直接丢弃。
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以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 抗凝全血(本实验以5 ml人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头(2.5 μl,10 μl ,200 μl ,1ml),15 ml离心管3. 无水乙醇,70%乙醇,干净的吸水纸4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
血液基因组 DNA提取试剂盒操作指南(DP348) ——200μl~1ml 抗凝全血
以下操作按照天根产品 DP348 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 抗凝血 200 μl~1ml抗凝全血2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml)3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机备注:本实验以人血为例,如提取哺乳动物全血可以用此流程,如果禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液,红细胞有核细胞,因此处理量为5-20 μl,当处理
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