猪（Porcine）抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)EL

猪（Porcine）抗心磷脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA检测试剂盒 

产品货号：DM-P6624

产品规格：48/96T

上海笃玛生物科技有限公司搭建生物样品、测序、分子检测等六da一体化科研平台，自研高特异性ELISA试剂盒，全品类万余种试剂常备现货，同时深度合作十余国际知名生物品牌，可承接从试剂采购、样本检测到课题整体外包的全链条科研服务。

 

LISA依托抗原与抗体特异性免疫结合，结合酶的高效催化显色反应实现定量检测。

直接法将待测抗原包被至微孔板，洗涤封闭后直接加入HRP标记特异性一抗，标记抗体与固相抗原直接结合；HRP催化TMB底物显色，抗原含量越高颜色越深；酶标仪测定吸光度，结合标准曲线，完成抗原定量检测。

ELISA试剂盒的四

试剂盒的组成

ELISA试剂盒标准操作流程（双抗体夹心为列）

ELISA 核心原理基于抗原与抗体的特异性结合以及酶高效催化显色反应，双抗体夹心 ELISA 采用一对识别抗原不同位点的配对抗体，预包被在微孔板内的捕获抗体结合样本中的靶抗原，再与生物素化检测抗体形成夹心复合物，通过 HRP 标记链霉亲和素结合生物素完成信号标记，HRP 催化 TMB 底物产生显色反应，抗原浓度越高显色越深，酶标仪测定吸光度值，结合标准曲线即可实现靶抗原定量检测。

样本前处理

ELISA检测前需对血清、组织、细胞上清、尿液等各类样本开展离心、匀浆、过滤、分装冻存标准化前处理，消除杂质干扰保障检测数据准确。

 

加样与孵育

ELISA检测按照标准化顺序依次向微孔板加入标准品、待测样本、生物素标记抗体，每步加样完成后恒温孵育充分发生特异性免疫结合，孵育结束后洗涤去除未结合杂蛋白，为后续显色反应奠定基础。

 

洗板（核心关键步骤）

洗板采用稀释后的浓缩洗涤液充分浸泡微孔，反复冲洗去除孔内未特异性结合的游离蛋白、多余抗体与杂质，降低非特异性吸附带来的背景干扰，最da程度提升检测结果灵敏度与准确度。

 

加酶结合物与二次孵育

向微孔板加入HRP标记链霉亲和素，链霉亲和素能够与免疫复合物上的生物素特异性结合，使标记酶富集在夹心复合物上完成信号标记，二次孵育提供适宜温度与充足反应时间，促进二者充分结合，孵育完成后充分洗板去除未结合的游离酶结合物，防止多余酶造成背景升高，保证后续显色强度和靶抗原浓度呈良好对应关系。

 

二次洗板

二次洗板是酶结合物孵育结束后的关键净化步骤，主要用于彻底洗脱微孔内未成功结合生物素的游离HRP酶标试剂、残留杂蛋白与反应体系杂质，杜绝游离酶残留引发的非特异性底物催化反应，有效降低实验背景干扰、规避假阳性结果。规范操作下全程洗涤5次，每次加入洗涤液充分浸润孔底与孔壁30秒，使残留杂质充分溶解洗脱，随后彻底弃液、吸水纸拍干孔内残留液体，避免稀释后续底物试剂、破坏反应体系平衡，精准保障后续显色强度仅与特异性结合的夹心免疫复合物数量成正比，da幅提升ELISA检测的精准度与重复性。

 

底物显色

向微孔板添加TMB显色底物溶液，夹心免疫复合物上富集的HRP辣根过氧化物酶可高效催化底物发生氧化显色反应，样本中靶抗原含量越高，孔内显色蓝色越深；避光恒温孵育提供稳定反应环境，保障酶促催化充分进行，孵育时长严格统一以均衡各组显色程度，孵育完成后即可开展终止操作，保证显色深浅可直观对应靶抗原的含量水平。

 

终止反应与读数

向微孔板加入酸性终止液快速灭活HRP酶活性，阻断底物持续氧化，孔内蓝色显色产物转变为稳定黄色，避免过度显色带来数值偏差；终止完成后短时间内上机检测，将微孔板置于酶标仪设定对应波长读取各孔吸光度OD值，结合梯度标准品构建标准曲线，依据样本吸光度换算靶抗原精确浓度，完成样本定量检测。

 

数据处理

整理酶标仪导出的全部吸光度数值，以标准品浓度与对应OD值拟合标准曲线，计算曲线相关系数确保线性达标；剔除异常离群样本数据，代入曲线公式计算待测样本靶抗原浓度，同时计算组内、组间变异系数，评估实验重复性，最终汇总全部有效检测数据形成完整实验报告。

 

ELISA试剂盒核心性能评价指标

1.检测下限：代表试剂盒可稳定识别的最低靶标含量，指标数值越小，对微量低浓度样本的检出能力更优异。

2.定量线性区间：指吸光度信号和靶标浓度呈现标准线性关联的浓度范围，范围更广可减少样本稀释步骤，简化实验操作。

3.加标回收率：用来衡量检测数值和样本真实含量的贴合度，回收率越接近100%，检测结果真实可靠度越高。

4.重复性：包含同板重复检测、不同批次板检测两种维度，依靠变异系数CV评判，CV数值越低，多次检测结果偏差越小。

5.抗干扰特异性：衡量试剂盒和结构相似杂质、同源蛋白发生交叉反应的概率，交叉反应越低，假阳性出现概率越低。

6.储存稳定能力：通过长期冷藏存放、开盖短期使用、高温加速试验综合验证，判定试剂长期保存后性能是否不发生衰减。

 

结果计算

先扣除空白孔吸光度校正数值，用标准品浓度与对应OD值拟合有效标准曲线，将样本校正吸光度代入公式算出稀释后浓度，再乘稀释倍数得到原始样本靶抗原含量，同时核对质控数据判定结果是否有效。

（图片仅共参考）

 

售后服务

上海笃玛生物科技有限公司拥有专业的技术服务团队，为您提供全程技术支持。如您在产品使用过程中有任何疑问，或对产品质量有异议，请及时联系我们的技术顾问，我们将在24小时内响应，为您提供实验方案优化、问题排查等专业服务。

企业介绍：

上海笃玛生物科技有限公司是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业总部位于上海，并在全国设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“笃玛生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及先进的仓储和物流系统。“笃玛生物”已经得到全国科研工作者的认可。公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广da科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买笃玛生物产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。