percoll分离死细胞

percoll分离液的配制

Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 撰写　金伯泉 -------------------------------------------------------------------------------- 　　(一)　原理 　　Percoll

配制percoll细胞分离液

的 Percoll,如用10ml试管(或塑料管)分离,每层Percoll约1.2～1.5ml，初步从外周血中分离的PBMC细胞1×10８悬于１ml培 基中，按要求装样、离心和取样。一般富含NK杀伤活性的LGL细胞位于42.5％与45％Percoll界面以及上下二层的Percoll液中。 2.　纯化淋巴母细胞和除去死细胞：分别叠加50％和30％Percoll液。收取经PHA(或其它抗原、有丝分裂原)刺激PBMC,或含有较高比例异 型的PBMC(如肾综合征出血热患者)，按要求装样

Percoll细胞分离液的使用方法

实验原理   Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低(２ O)，粘度也很小，可形成高达1.3g／mL密度，采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200～1000g)于数分至数十分钟内达到满意的细胞分离结果。由于Percoll扩散常数低，所形成的梯度十分稳定。此外，Percoll不穿透生物膜，对细胞无毒害，因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分、细菌及病毒，还可将受损细胞及其碎片与完好的活细胞分离。 实验