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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
仓鼠
- 应用:
科研
- 检测方法:
双抗原夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
仓鼠固胆固醇转运蛋白(NPC1L1)ELISA检测试剂盒
基础信息
- 中文名称:仓鼠固胆固醇转运蛋白(NPC1L1)ELISA检测试剂盒
- 英文名称:Hamster NPC1‑like intracellular cholesterol transporter 1 (NPC1L1) ELISA Kit
- 检测方法:双抗体一步夹心法
- 规格:48T / 96T
- 种属:仓鼠
- 保存条件:2‑8℃避光保存,禁止冷冻
- 有效期:6 个月
- 检测波长:酶标仪 450 nm
适用样本类型
血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液等生物液体样本。
检测原理
采用双抗体夹心 ELISA 原理:
1. 酶标板预先包被仓鼠 NPC1L1 特异性捕获抗体;
2. 加入标准品 / 待测样本,同时加入 HRP 标记检测抗体,孵育形成**固相抗体‑抗原‑HRP 标记抗体**免疫复合物;
3. 洗板去除未结合组分,加入 TMB 底物显色;HRP 催化底物生成蓝色,加终止液转为黄色;
4. 450nm 读取 OD 值,根据标准曲线计算样本 NPC1L1 蛋白浓度。
试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液 终止液
酶标试剂 标准品
酶标包被板 标准品稀释液
样品稀释液 说明书
显色剂A液 封板膜
显色剂B液 密封袋
自备实验器材
酶标仪(450nm)、移液器及枪头、37℃恒温孵育箱、去离子水、离心管等。
简要操作流程
1. 试剂盒所有组分室温平衡 20min;浓缩洗涤液按比例稀释。
2. 设置标准品孔、样本孔、空白孔;加标准品 / 待测样本。
3. 加入 HRP 标记抗体,封板,37℃温育 60min。
4. 弃液,洗板 5 次,拍干。
5. 加入 TMB 显色液,37℃避光孵育 15‑20min。
6. 加入终止液,酶标仪 450nm 测 OD 值。
7. 标准曲线拟合,计算样本 NPC1L1 浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
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文献和实验仓鼠固胆固醇转运蛋白(NPC1L1)ELISA检测试剂盒
的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中,封闭一般是不可少的(见2.2.2)。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。 ELISA相关试剂设备 洗板机 化学发光检测仪 酶标仪 ELISA检测试剂盒 ELISPOT检测 ELISA试剂盒 抗体
性的提高。小试管还可以当作比色杯,最后直接放入分光光度计中比 色。 也有应用聚苯乙烯胶乳或其他材料制成的微粒作为ELISA固相载体的。其优点是表面 积极大,反应在悬液中进行,其速率与液相反应近似。以含铁的磁性微粒作为ELISA固相 载体,反应后用磁铁的吸引进行分离,洗涤方便,试剂盒一般均配以特殊仪器。 3.1.2 包被的方式 将抗原或抗体固定在过程称为包被(coating)。换言之,包被即是抗原或抗体结合到固 相载体表面的过程。蛋白质与聚苯乙烯固相载体
应用于各种抗原物质的定量测定。脂类物质无法与固相载体结合,可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后加入ELISA板孔中,开盖置冰箱过夜或冷风吹干,待酒精挥发后,让脂质自然干固在固相表面。抗心磷脂抗体的ELISA试剂一般采用这种包被方式。(三)包被用抗原 用于包被固相载体的抗原按其来源不同可分为天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。天然抗原可取自动物组织、微生物培养物等,须经提取纯化才能作包被用。如HBsAg可以从携带者的血清中提取,一般的细菌和病毒抗原可以从其培养物中提取,蛋白成份抗原可从富含
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