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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 库存:
999
- 生长状态:
贴壁生长
- 运输方式:
常温/干冰
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 物种来源:
人
- 组织来源:
胰腺/导管
- 规格:
1x10⁶cells
PANC-1/Luc人胰腺癌细胞荧光素酶标记
产品编号:CL-800h
一、细胞介绍
该人胰腺癌细胞PANC-1来源于一名56岁白人男性。1 U/ml 左旋天冬酰胺酶(L-asparaginase)可抑制其生长。此细胞可以在琼脂糖上生长。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
二、细胞特性
来源:人胰腺/导管
形态:上皮细胞样,贴壁生长
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/ 含有1mL细胞悬液的冻存管x2(干冰运输)
用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途
注意:每传 10 代左右,用嘌呤霉素(4ug/ml)巩固一下
三、完全培养基及冻存液配制
1) 该细胞完全培养基为:DMEM+10%优质胎牛血清+1%双抗
2) 培养环境:气相:空气95%,二氧化碳5%;温度:37℃;培养箱湿度:70%-80%
3) 冻存液:90%FBS+10%DMSO,现用现配
四、收货注意事项
1) 收到细胞后,复苏活细胞请检查培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,或者冻存细胞的干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落,请拍照后及时与我们联系。
2) 75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37℃培养箱静置约2-4h,在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5×物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10×和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 贴壁生长的细胞处理:①静置后显微镜下观察细胞生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。②若细胞密度未超过80%,可去除培养瓶中旧液(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新的完全培养基5mL,放入培养箱中继续培养(若培养瓶为密封瓶盖须拧松瓶盖)。③若细胞密度超过80%,请立即传代(若因运输振动脱落的细胞需要离心回收),首次传代,建议1:2传代(两个T25培养瓶)。
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文献和实验量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
、 过氧化物酶标记的第二抗体。15、 NBT(溶于70%二甲基甲酰胺,75mg/ml)。16、 BCIP(溶于100%二甲基甲酰胺,50mg/ml)。17、 100mmol/LTris-HCL(pH9.5)。18、 100mmol/L NaCl。19、 50mmol/LTris-HCL(pH7.5),5mmol/L EDTA。(可以参看分子克隆)四、主要步骤生物秀为您搜集了现阶段几乎网上所有的Western Blot的中英文资料,仅供实验参考,可以根据自己实验的实际情况进行调整:五、 实验常见的问题
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