人B细胞活化因子(BAFF/CD257)ELISA试剂盒产品图

人B细胞活化因子(BAFF/CD257)ELISA试剂盒

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  • ¥1500 - 2200
  • 抚生已认证
  • 125pg/mL-4000pg/mL
  • 62.5pg/mL
  • A113888
  • 国产
  • 2026年08月05日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
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    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      20

    • 灵敏度

      62.5pg/mL

    • 样本

      血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本

    • 标记物

      血清/血浆

    • 适应物种

      大鼠、小鼠、人、植物

    • 应用

      ELISA试剂盒

    • 检测方法

      ELISA法

    • 检测范围

      125pg/mL-4000pg/mL

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1500.0
    规格:96T产品价格:¥2200.0
    检测原理:
    通过特异性抗人BAFF/CD257单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的BAFF/CD257结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与BAFF/CD257含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
    性能参数:
    产品名称:B细胞活化因子(BAFF/CD257)ELISA试剂盒
    英文名称:Human BAFF/CD257 ELISA Kit
    产品规格:48T/96T
    检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
    检测范围:125pg/mL-4000pg/mL
    灵敏度:62.5pg/mL
    ‌特异性‌:与人其他细胞因子无交叉反应。
    ‌有效期‌:6个月(2-8℃保存)。
    检测流程:
    1、固相抗体包被‌
    微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人B细胞活化因子(BAFF/CD257)中的特定表位。
    2、样本加入与抗原结合‌
    将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的BAFF/CD257会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
    ‌3、酶标二抗结合‌
    加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别BAFF/CD257的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-BAFF/CD257-检测抗体”的三明治结构。
    4、显色反应‌
    洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
    5、定量分析‌
    使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中BAFF/CD257浓度呈正相关。
    数据及参考曲线:
    校准品浓度(pg/mL) 4000.00 2000.00 1000.00 500.00 250.00 125.00 62.50 0.00
    OD450/630值 2.722 1.596 0.874 0.498 0.311 0.163 0.091 0.046
    校正OD值 2.676 1.550 0.828 0.452 0.265 0.118 0.045 0.000

    产品细节图片1

    操作步骤:
    1.加样孵育

    每孔精准加入 100μL 对应标准品 / 待测样本,空白孔加等量样本稀释液;贴封板膜密封微孔板,置于 37℃恒温孵育箱,避光孵育 90min,保证抗原抗体充分结合。
    2.首次洗板
    轻柔弃去孔内液体,吸水纸上快速拍干;每孔加满洗涤工作液,静置浸泡 30s,甩干拍净;重复洗涤5 次,彻底去除未结合杂质,降低背景值。
    3.加酶结合物孵育
    除空白孔外,每孔加入 100μL HRP 标记特异性检测抗体;轻微水平晃板混匀,重新封板,37℃避光恒温孵育 60min。
    4.二次洗板
    重复上述洗板操作 5 次,严格拍干孔内残留液体,杜绝残留洗液造成假阳性、数据偏差。
    5.底物显色
    避光条件下,每孔加入 90μL TMB 底物显色液,轻柔混匀;37℃避光精准孵育 10~15min,此时液体逐步显现蓝色,显色深浅与待测物含量正相关。
    6.反应终止
    严格遵循加样顺序,每孔快速加入 50μL 酸性终止液,轻晃微孔板充分混匀,蓝色即刻转为黄色,终止酶促显色反应。
    7.上机读数检测
    加终止液后15min 内,用酶标仪测定各孔 450nm 波长吸光度(OD 值);以标准品浓度为横坐标、OD 值为纵坐标绘制标准曲线,拟合方程计算待测样本目标蛋白浓度。
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