犬转化生长因子β2(TGFb2)ELISA试剂盒

检测原理：
通过特异性抗犬TGFb2单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的TGFb2结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与TGFb2含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:犬转化生长因子β2(TGFb2)ELISA试剂盒
英文名称:Dog TGFb2 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：15.6pg/mL-1,000pg/mL
灵敏度：7.8pg/mL
‌特异性‌：与人其他细胞因子无交叉反应。
‌有效期‌：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被‌
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合犬转化生长因子β2(TGFb2)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合‌
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的TGFb2会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
‌3、酶标二抗结合‌
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别TGFb2的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-TGFb2-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应‌
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析‌
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中TGFb2浓度呈正相关。
数据及参考曲线：

操作步骤：
1.试剂提前室温平衡 30 min，浓缩洗涤液按说明书稀释配制。
2.设置空白孔、标准品孔、待测样品孔，精准加样后封板。
3.37℃恒温孵育结合反应，结束后弃孔内液体拍干。
4.加满洗涤液浸泡清洗，重复洗板 3–5 次，彻底去除未结合杂质。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶结合物，再次 37℃温育。
6.重复洗板流程洗净游离酶标抗体，保证背景干净。
7.依次加入显色液避光显色，待梯度蓝色清晰显现。
8.加入终止液终止反应，颜色由蓝转黄，即刻用酶标仪读取 OD 值。
9.根据标准曲线拟合计算，得出样本目标物质浓度。‌
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