大鼠血小板衍生生长因子AA（PDGFAA）ELISA检测试剂

大鼠血小板衍生生长因子AA（PDGFAA）ELISA检测试剂盒

基本参数
检测原理：大鼠血小板衍生生长因子AA（PDGFAA）ELISA检测试剂盒
特异性：识别天然 / 重组大鼠 PDGF-AA，与 PDGF-BB、PDGF-AB 无交叉反应
样本类型：血清、血浆（EDTA 抗凝）、细胞培养上清、组织匀浆
规格：96T/48T
保存条件：2-8℃

试剂盒组分（96T）
预包被 96 孔酶标板（抗大鼠 PDGF-AA）
标准品（冻干，重组大鼠 PDGF-AA，6000 pg/mL）
标准品稀释液
生物素化抗大鼠 PDGF-AA 抗体（100× 浓缩）
HRP 标记链霉亲和素（SA-HRP，100× 浓缩）
浓缩洗涤液（20×，含 Tween-20）
TMB 底物显色液
终止液（2N H₂SO₄）
封板膜、说明书

实验流程
试剂平衡：所有试剂室温（20–25℃）放置≥30 min；洗涤液 1:19 稀释。
标准品稀释：复溶后梯度稀释为 6000、3000、1500、750、375、187.5、93.75 pg/mL。
加样孵育：每孔加 100 μL 标准品 / 样本，37℃孵育 90 min。
洗板：弃液，洗涤液洗 5 次，拍干。
加检测抗体：每孔加 100 μL 生物素化抗体工作液，37℃孵育 60 min。
洗板：重复洗板 5 次，拍干。
加酶结合物：每孔加 100 μL SA-HRP 工作液，37℃孵育 30 min。
洗板：重复洗板 5 次，拍干。
显色：每孔加 90 μL TMB，37℃避光显色 15 min（蓝色）。
终止：每孔加 50 μL 终止液（变黄），5 min 内450 nm测 OD 值。
结果计算：标准曲线（四参数拟合），样本浓度 × 稀释倍数。

样本要求
1. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2. 不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。