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文献和实验1.选用适合您成像需求的显微镜 并非所有显微镜都同样适合活细胞成像。例如,倒置显微镜从样品下方成像,非常适合活细胞成像。这样可使物镜更靠近活体标本,而这对于大多数高数值孔径(NA)物镜来说是必需的要求。 2.使用盖玻片底培养皿 部分塑料底培养皿会增加自发荧光并降低信噪比(S/N)。在对背景要求较高的实验中,可优先选择成像级低自发荧光材料或盖玻片底培养皿。 3.使用透射率较高的荧光滤光片提高信噪比 荧光滤光片镜组及其内部的滤光片是活细胞荧光成像实验重要的硬件之一。 选用具有高透射率的滤光
panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参? 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了? lwjssry 不可以,一定要用内参,需要校正对照和处理组细胞数目的差异
流式课堂 | 细胞带有 GFP 荧光时,如何进行流式凋亡分析?
随着生物研究进入基因时代,转染技术的应用越来越广泛。在此过程中,通常会引入 GFP(绿色荧光蛋白)标签,去验证转染是否成功。 在之前的流式课堂中,我们曾多次提到过流式配色问题。今天,就来带大家看看,带有 GFP 标签的细胞,在流式凋亡检测中,应该如何配色和分析结果。 一、如何选择试剂盒 挑选试剂盒时,需要选择干扰少的荧光组合。GFP 的激发/发射波长为 488/510,通常在流式细胞仪中的检测通道为 FL1。因此,我们不能选择荧光标签为FL1检测通道的凋亡检测试剂盒,如 AF488
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