绵羊肿瘤坏死因子α(TNFa)ELISA试剂盒产品图

绵羊肿瘤坏死因子α(TNFa)ELISA试剂盒

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  • ¥1500 - 2200
  • 抚生已认证
  • 3.125pg/mL-50pg/mL
  • 1.5625pg/mL
  • A117295
  • 国产
  • 2026年07月20日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      20

    • 灵敏度

      1.5625pg/mL

    • 样本

      血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本

    • 标记物

      血清/血浆

    • 适应物种

      大鼠、小鼠、人、植物

    • 应用

      ELISA试剂盒

    • 检测方法

      ELISA法

    • 检测范围

      3.125pg/mL-50pg/mL

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1500.0
    规格:96T产品价格:¥2200.0
    商品属性:
    360截图20260205140059.png
    产品名称 绵羊肿瘤坏死因子α(TNFa)ELISA试剂盒 英文名称 Sheep TNFa ELISA Kit
    灵敏度 1.5625pg/mL-50pg/mL 检测范围 3.125pg/mL-50pg/mL-50pg/mL
    产品货号 A117295 用途 仅供科研研究实验
    检测原理:
    360截图20260205140059.png
    通过特异性抗绵羊TNFa单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的TNFa结合形成固相抗体复合物。加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的检测抗体后,形成“捕获抗体-TNFa-通过-检测抗体”的三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB产生蓝色产物,在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
    数据及参考曲线:
    360截图20260205140059.png
    校准品浓度(pg/mL) 50.00 25.00 12.50 6.25 3.13 1.56 0.78 0.00
    OD450/630值 2.700 1.601 0.788 0.491 0.368 0.164 0.101 0.035
    校正OD值 2.665 1.565 0.753 0.456 0.333 0.129 0.066 0.000

    产品细节图片1

    实验原理:
    360截图20260205140059.png
    该方法采用双抗体夹心ELISA技术:
    微孔板预先包被特异性抗绵羊TNFa单克隆抗体(捕获抗体);
    加入待测样本后,样本中的TNFa与固相抗体结合;
    随后加入生物素化或HRP标记的检测抗体,形成“捕获抗体-TNFa-检测抗体”复合物;
    洗涤后加入HRP标记的亲和素(若使用生物素-亲和素系统),再加入TMB底物显色;
    HRP催化TMB生成蓝色产物,酸性终止液使其变为黄色;
    450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与LYL1117胰淀素浓度呈正比,通过标准曲线计算浓度。
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    实验步骤:
    360截图20260205140059.png
    一、试剂准备
    所有试剂使用前平衡至室温(18–25℃);
    洗涤液按比例稀释(如10×稀释为1×);
    标准品用稀释液复溶并进行倍比稀释(如0、0.5、1、2、4、8 ng/mL)。
    ‌二、加样‌
    设立标准孔、样本孔和空白孔(仅加稀释液);
    每孔加入50 μL标准品或待测样本;
    可对血清/血浆样本进行1:2预稀释以减少基质干扰。
    三、温育
    封板后37℃温育60分钟,使抗原充分结合;
    温育期间避免阳光直射。
    四、洗涤
    弃去孔内液体,每孔注入300–350 μL洗涤液;
    静置30秒至1分钟,甩干,重复5次;
    拍干微孔板,避免残留液滴影响后续反应。
    ‌五、加酶标抗体‌
    每孔加入100 μL生物素化检测抗体;
    37℃避光温育60分钟。
    ‌六、再次洗涤‌
    同上法洗涤5次,确保彻底清除未结合抗体。
    ‌七、加HRP-亲和素‌
    每孔加入100 μL HRP标记亲和素;
    37℃避光温育30–60分钟。
    八、第三次洗涤
    再次洗涤5次,拍干。
    ‌九、显色‌
    每孔加入显色剂A和B各50 μL(或TMB单组分90–100 μL);
    37℃避光显色15–30分钟,观察颜色变化。
    ‌十、终止反应‌
    每孔加入50 μL终止液,轻轻震荡混匀;
    溶液颜色由蓝变黄,立即进行测定。
    ‌十一、读数与分析‌
    使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值;
    以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线;
    将样本OD值代入方程,计算TPS浓度。

     

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