大鼠谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）ELISA检测试剂盒

大鼠谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）ELISA检测试剂盒

基本信息
产品名称：大鼠谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）ELISA检测试剂盒
货号：XK-E13570h
规格：48T/96T
用途：检测血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等样本中大鼠 GSTa5 浓度，仅供科研使用，不得用于临床诊断。
保存与有效期：2-8℃保存，有效期 6 个月；开封后组分 2-8℃可保存 14-180 天不等。

检测原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）水平。用纯化的大鼠谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5），再与 HRP 标记的谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中谷胱甘肽S转移酶α5（GSTa5）浓度。

试剂盒组分
30倍浓缩洗涤液              终止液
酶标试剂                         标准品
酶标包被板                       标准品稀释液
样品稀释液         说明书
显色剂A液        封板膜
显色剂B液        密封袋

样本要求
1. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2. 不能检测含NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤（96T）
试剂复温：所有组分室温（20-25℃）平衡≥120min。
洗涤液配制：20× 浓缩洗涤液与蒸馏水 1:20 稀释。
加样：标准品孔加 50μL 梯度标准品，样本孔加 50μL 待测样本，0 值孔加 50μL 样本稀释液，空白孔不加。
加酶标抗体：除空白孔，每孔加 100μL HRP 标记抗体，封板膜覆盖，37℃避光孵育 60min。
洗板：弃液拍干，每孔加满洗涤液，静置 20s，重复 5 次。
显色：底物 A、B 按 1:1 混合，每孔加 100μL，37℃避光孵育 15min。
终止：每孔加 50μL 终止液，15min 内酶标仪 450nm 读 OD 值。
结果计算：四参数 Logistic 拟合标准曲线，计算样本浓度，稀释样本需乘以稀释倍数。

注意事项
不同批次试剂盒组分不可混用，仅用配套试剂。
底物液变蓝则失效，终止液具腐蚀性，避免接触皮肤。
样本避免反复冻融，勿用叠氮-钠防腐剂。
实验需做复孔，保证结果准确性。