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- 烜雅生物
- XY-PCR598Y
- 国产
- 2026年09月23日
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100
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12个月
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T/盒
大豆转基因DAS-81419-2基因核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
产品概述
本试剂盒采用实时荧光 PCR - 探针法，特异性检测转基因大豆品系DAS-81419-2（抗虫 / 抗除草剂）的外源基因序列，适用于大豆种子、原料、加工食品及饲料的定性 / 定量检测，满足科研鉴定需求。
检测原理
针对 DAS-81419-2 品系外源插入基因（CRY1AC、CRY1FV3、PAT） 设计特异性引物与FAM 标记探针；PCR 扩增时探针与模板结合并被酶切，释放荧光信号，仪器实时监测荧光增长，通过Ct 值判定结果。
产品规格
包装：50T
形态：单管预混液（含引物、探针、酶、dNTP、缓冲液）
有效期：12 个月（-20℃避光）
运输：干冰 / 冰袋，避免反复冻融。
试剂盒组分
PCR 预混液：50 管 ×20μL（FAM 通道）
阳性对照（质粒）：1 管 ×50μL（10⁴拷贝 /μL）
阴性对照（非转基因大豆 DNA）：1 管 ×50μL
无酶水：1 管 ×1mL
说明书：1 份。
操作流程
样本处理：按 GB/T 19495.3-2004 提取基因组 DNA，浓度 5–50ng/μL。
加样（冰上）：
预混液：18μL
模板 DNA：2μL（阴性 / 阳性对照同体积）
PCR 程序（荧光定量 PCR 仪）：
95℃预变性：10min
95℃变性：15s → 60℃退火 / 延伸：60s（40 循环，收集 FAM 荧光）。
结果判读：
阳性：Ct≤36，S 型扩增曲线
阴性：Ct≥40，无扩增曲线
无效：阳性对照无扩增或阴性对照有扩增。
适用仪器
支持FAM/HEX通道的实时荧光 PCR 仪（如 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480）。
注意事项
实验分区（试剂准备 / 样本制备 / 扩增），防气溶胶污染。
试剂避光保存，解冻后混匀离心，避免反复冻融。
扩增后严禁开盖，防止污染；废液密封处理。
本产品仅供科研，不作临床使用。
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文献和实验大豆转基因DAS-81419-2基因核酸检测试剂盒（荧光PCR法）
大多是采用琼脂糖凝胶电泳法，首先检测CAMV-35S启动子和NOS终止子进行筛选，然后检测EPSPS抗草甘膦基因，操作烦琐、费时。本研究利用双重PCR技术同时扩增上述基因片段，用激光诱导荧光-毛细管电泳高效、快速检测PCR产物，显著提高了检测效率，并使灵敏度大为增加。本方法所需样品量少（nl级），快速、灵敏和准确，已成功用于实际转基因大豆样品的分析。1 材料和方法1．1 仪器与试剂毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置（自行组装），其中氦氖激光器（543.5nm，JDS Uniphase，USA）参数
为杜邦公司产品，操作按试剂盒说明书进行。用琼脂糖凝胶直接杂交的方法，较好地解决了微量核酸或低拷贝数转基因的检测问题，结果不仅直观，而且特异性好。与常规的Southern杂交相比，它所具有的优势是，它省略了将DNA进行转膜的步骤，从而避免了因转膜不完全所造成的DNA量的损失，特别是低拷贝数基因的丢失。另一方面，也使复杂的Southern杂交操作程序大大简化。因此，在转基因鼠的鉴定中以及微量核酸检测、疾病诊断中是防止低拷贝数基因漏检的一种可行途径。 问题3：在向下
，使用玉米偏爱的密码子。原始基因中GC含量是38%, 而人工基因的GC含量为65%。 将人工基因连接到盒式载体上，后接一个来自于CaMV的多腺苷酸化信号，利用微粒轰击法将其引入玉米的胚中。胚胎长成植株后，利用PCR法鉴定。利用人工基因特异的片段作为PCR引物。 下一步工作就是利用免疫技术鉴定植株是否合成了δ-内毒素，结果显示人工基因确实具有活性。不同植株中产生的δ-内毒素数量不同，从250-1750ng/mg总蛋白，这种差异是由位置效应引起的。 图11-28 位置效应 转基因植株是否
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