转基因水稻LLRICE601 核酸检测试剂盒(荧光-PCR

转基因水稻LLRICE601 核酸检测试剂盒(荧光-PCR 法)

产品概述
产品名称：转基因水稻LLRICE601 核酸检测试剂盒(荧光-PCR 法)
检验原理：本试剂盒用国家标准的 Rice601 特异性引物和探针，用荧光 PCR 技术进行转基因成分的检测。

产品规格与组成
规格：50 T / 盒（50T）
主要组分：
名    称    规    格
酶液    50μL×1 管
Rice601 反应液    1.0mL×1 管
Rice601 阳性质控品    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

适用样本
水稻种子、稻谷、米粉、米饼、米蛋白、饲料及水稻深加工制品。

仪器适配
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

操作流程
样本前处理：研磨样本至细粉，取适量提取基因组 DNA（磁珠法 / 离心柱法，建议含 RNase A）。
反应体系配制（冰上操作）：
20 μL 体系：19 μL 预混反应液 + 1 μL 酶液，分装至 PCR 管。
加模板：5 μL 待测 DNA / 阳性对照 / 阴性对照。
PCR 扩增程序：
去污染：37℃ 10 min，1 循环。
预变性：95℃ 2 min，1 循环。
扩增（40 循环）：95℃ 10 sec → 60℃ 30 sec（FAM 通道采集荧光）。
结果判读：
阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；
可疑：检测通道 35
阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。

保存与有效期
保存条件：-20℃避光，避免反复冻融（≤5 次）。
有效期：12–15 个月（未开封）。
运输：干冰 / 冰袋低温运输。

注意事项
所有操作严格按照说明书进行；
试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
反应液应避光保存；
反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。