PLA-TK-PEI-FA

细胞转染技术原理及应用（瞬时转染和稳定转染）

作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA 比超螺旋DNA 转入量低但整合率高。 外源DNA 整合到染色体中概率很小，大约1/104 转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移 酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B 磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细 胞系。 转染技术的选择对转染结果影响也很大，许多转染方法需要优化DNA 与转染 试剂 比例，细胞数量，培养及检测 时间等。一些传统的转染技术，如DEAE 右旋

转染技术简介

比超螺旋DNA 转入量低但整合率高。外源DNA 整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记，如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素B磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。转染技术的选择对转染结果影响也很大，许多转染方法需要优化DNA 与转染试剂比例，细胞数量，培养及检测时间等。一些传统的转染技术，如DEAE右旋糖苷法，磷酸钙法，电穿孔法，脂质体法各有利弊，其主要原理及应用特点见下表

细胞转染技术原理及应用

,在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果,常常用到一些报告系统如 荧光蛋白 ,β半乳糖苷酶等来帮助检测.后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体（episome）存在.尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高.外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因）,潮霉素B磷酸转移酶（HPH）,胸苷激酶（TK）等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系.