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文献和实验Conjugation of Nanoparticles to Proteins
. First, stable and biocompatible 1.5nm gold nanoparticles are synthesized. Conjugation of the nanoparticle to the protein is then achieved via two different approaches that do not require heavy chemical modifications or cloning: cysteine–gold covalent bonding
碱的条件下二者才能牢固地结合,实验证实SPA标记的最适pH为6.0,符合预测。3、 胶体金标记SPA复合物的制备与纯化 将胶体金溶液pH值调至6.0,30ml胶体金溶液在磁力搅拌下缓缓加入180μl SPA溶液(1mg/ml),加入PEG20000增加胶体金溶液的稳定性,超速离心纯化后在Tecnai10透射电镜下观察,可见金颗粒外围有明显的低密度晕圈,表明金颗粒表面吸附有蛋白。4、临床血清标本H.pylor抗体IgG检测结果 53份受检血清中抗Hp血清抗体IgG胶体金法阳性21份,疑似7份,阴性25
。 6、IgG-gold的制备 (1) 取两个1.5 ml试管,分别加入1.2 ml 10 nm胶体金; (2) 加入适量25 mM K2CO3把pH调整为9.0; (3) 分别加入10 ml浓度为1 mg/ml IgG,混匀,室温放置10min; (4) 分别加入12 ml 2% PEG20000,室温放置5 min; (5) 10000 rpm离心20 min,轻轻吸除上清; (6) 用20 ml BL溶液重悬浮松散的胶体金沉淀,并集中到新管中; (7) 分别加20 ml
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